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ICS65.020.01
B50
DB43
湖南省地方标准
DB43/T700—2012
草鱼肠炎病检疫技术规程
TechnicalcodeofquarantinefortheGrasscarpenteritisdisease
2012-07-24发布2012-12-10实施
湖南省质量技术监督局发布
I
DB43/T700—2012
目次
前言 Ⅱ
1范围 1
2规范性引用文件 1
3检疫方法 1
3.1检疫程序 1
3.2流行病学调查 1
3.3目检 1
3.4产地检疫采样 1
3.5解剖检查 1
3.6病原分离鉴定 2
3.6.1实验准备 2
3.6.2病原菌分离 2
3.6.3病原菌鉴定 2
4判定 2
5无害化处理 2
附录A(资料性附录)流行病学调查方法 3
附录B(资料性附录)普通琼脂平板培养基的制备方法 4
II
DB43/T700—2012
前言
本标准按GB/T1.1-2009的规则编制。
本标准由湖南省畜牧水产局提出并归口。
本标准起草单位:湖南省水生动物防疫检疫站。
本标准主要起草人:肖光明、江为民、周文。
DB43/T700—2012
1
草鱼肠炎病检疫技术规程
1范围
本标准规定了草鱼肠炎病(Grasscarpenteritisdisease)的检疫方法、判定和无公害化处理。本标准适用于我省草鱼肠炎病的检疫。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的,凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件,凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T18652SC/T7103SC/T7014
致病性嗜水气单胞菌检验方法
水生动物产地检疫采样技术规范水生动物检疫实验技术规范
DB43/221水生动物检疫规程
3检疫方法
3.1检疫程序
按DB43/221的规定执行。
3.2流行病学调查
流行病学调查方法参见附录A。
3.3目检
目检到以下症状,可初步确定为草鱼肠炎病。
.检疫人员站在池边静态观察,或者投饲观察鱼群,发现草鱼不集中抢食,反应迟钝,部分鱼离群独游,活动缓慢,徘徊于岸边,食欲减退或完全不吃食。
抽检病鱼,鱼体发黑,鳞片松弛,腹部肿大;两侧常有红斑;肛门红肿突出,轻压腹部有黄色黏液或脓血从肛门流出,将鱼头部拎起,有的鱼有黄色黏液从肛门流出。
3.4产地检疫采样
按SC/T7103的规定执行。
3.5解剖检查
解剖疑似病鱼有以下病理变化,可判定为草鱼肠炎病。
剖开鱼腹,可见腹腔积水,肠壁充血、发炎、呈红色或紫红色,严重时,肠黏膜溃烂脱落,与血液混合形成血脓充塞于肠管中,肠管松弛无弹性,轻拉易断。肠内无食物或只在肠的后段有少量食物,有
2
DB43/T700—2012
较多黄色或黄红色粘液。
3.6病原分离鉴定
对判定为肠炎病的草鱼应进行病原菌分离鉴定。
3.6.1实验准备
3.6.1.1设备和仪器
无菌室、显微镜、冰箱、恒温培养箱、接种环、研钵、剪刀、培养皿等。
3.6.1.2培养基
普通琼脂平板培养基制备方法参见附录B。
3.6.2病原菌分离
3.6.2.1实验室检疫采样
按SC/T7014的规定执行。
3.6.2.2取样
用无菌法采集病鱼肝、肾或腹水,剪碎,用研钵碾碎组织并制成组织悬液。
3.6.2.3划线接种
挑取组织悬液在普通琼脂平板上划线接种。
3.6.2.4分离培养
将划线接种的培养基置28℃恒温培养24h。挑选形态结构、颜色相同的单个菌落,在平板上再次划线分离纯化,28℃恒温培养24h。取单个菌落,用于鉴定。
3.6.3病原菌鉴定
嗜水气单胞菌的鉴定方法按GB/T18652的规定进行;
温和气单胞菌、豚鼠气单胞菌的鉴定参照GB/T18652的方法,按《伯杰氏鉴定细菌学手册》(第九版)的规定进行。
4判定
病鱼具有典型的肠炎病症状和病理变化,且病原菌鉴定为嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、豚鼠气单胞菌三种细菌中的任何一种细菌,可判定为草鱼细菌性肠炎病。
5无害化处理
5.1不得将病鱼异地(塘)转移或上市:病、死鱼应焚烧或加盖生石灰后深埋处理。
5.2养殖水体、运
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