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犬α7干扰素在大肠杆菌与毕赤酵母中的活性表达及特性比较研究

一、引言

1.1研究背景

干扰素（Interferon，IFN）作为一类具有多种生物活性的分泌型糖蛋白，在机体防御系统中占据着举足轻重的地位。自被发现以来，干扰素因其在抗病毒、抗肿瘤以及免疫调节等方面的显著功效，受到了科研人员的广泛关注。在抗病毒领域，干扰素能够激活机体免疫系统，增强对病毒的抵抗能力，通过诱导细胞产生抗病毒蛋白，如Mx蛋白，来抑制病毒复制，从而在控制病毒感染、阻止其在体内扩散以及促进疾病痊愈等方面发挥关键作用。在抗肿瘤方面，干扰素可以抑制肿瘤细胞的生长和分裂，诱导肿瘤细胞凋亡，对某些恶性肿瘤具有治疗效果。同时，干扰素还能调节免疫细胞的功能，增强机体免疫力，对体液免疫和细胞免疫均有免疫调节作用，对于巨噬细胞及NK细胞也有一定的免疫增强作用。

随着人们生活水平的提高，养犬作为一种日益流行的生活方式，使得犬类数量不断攀升。然而，犬类病毒性疾病的频繁爆发，如犬瘟热、犬细小病毒病、犬传染性肝炎和犬冠状病毒病等，给养犬业带来了巨大的挑战。这些疾病不仅发病率高、传染性强，而且死亡率也居高不下，严重制约了养犬业的健康发展，同时也对人类健康构成了潜在威胁，因为部分犬类病毒性疾病属于人兽共患病。传统的治疗方案在面对这些犬类病毒性疾病时，往往效果不佳，难以达到理想的治疗效果。因此，寻找一种有效的治疗和预防犬类病毒病的方法，成为了业内亟待解决的关键问题。

犬干扰素-α作为一种重要的抗病毒和免疫调节因子，在犬类疫病防治中具有巨大的潜力。犬干扰素-α基因全长为564个核苷酸，编码187个氨基酸，由23个氨基酸的信号肽和164个氨基酸的成熟蛋白组成，含有6个cys和2个潜在的N-糖基化位点。根据氨基酸序列和分子系统发育树，犬干扰素-α可分为两组，其中CaIFNα1、2和7为Ⅰ组，CaIFN-α3，4，5，6和8为Ⅱ组。然而，目前犬干扰素-α的研究和应用相对滞后，尤其是犬α7干扰素（CaIFN-α7），对其的研究更是有限。深入研究CaIFN-α7的活性表达及相关特性，对于开发新型犬类疫病防治药物、提高犬类健康水平具有重要的理论和实际意义。

1.2研究目的与意义

本研究旨在通过对犬α7干扰素在大肠杆菌与毕赤酵母中的活性表达进行深入探究，分析其表达产物的抗病毒活性等特性，为犬α7干扰素的进一步研究和应用奠定坚实的基础。

从理论层面来看，目前对于犬α7干扰素在不同表达系统中的表达机制以及其生物学活性的了解尚显不足。本研究将通过对大肠杆菌和毕赤酵母这两种常用表达系统的运用，详细分析犬α7干扰素的表达过程和活性特征，有助于填补这一领域在理论研究上的空白，加深对犬α7干扰素生物学特性的认识，丰富干扰素相关理论知识体系。

在实际应用方面，犬类病毒性疾病的肆虐严重威胁着养犬业的发展和犬类的健康。犬α7干扰素凭借其潜在的抗病毒和免疫调节活性，有望成为防治犬类病毒性疾病的有效生物制剂。通过本研究实现犬α7干扰素的高效活性表达，能够为开发新型、高效、安全的犬类疫病防治药物提供关键技术支持和物质基础。这不仅有助于提高犬类疫病的治疗效果，降低发病率和死亡率，促进养犬业的健康稳定发展，还能减少人兽共患病毒病的传播风险，保障人类健康。同时，对于推动生物制品产业的发展，提高我国在动物疫病防治领域的技术水平和创新能力也具有重要意义。

二、犬α7干扰素概述

2.1干扰素的分类与特性

干扰素是一类由机体细胞在病毒感染、双链RNA、细菌内毒素等多种诱导剂刺激下产生的具有广泛生物学活性的分泌型糖蛋白。根据其结构、基因序列以及受体的不同，干扰素主要分为三大类型：Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型。

Ⅰ型干扰素种类繁多，包括IFN-α、IFN-β、IFN-δ、IFN-ε、IFN-κ、IFN-τ和IFN-ω等。其中，IFN-α是由白细胞产生，具有强大的抗病毒活性，能够迅速响应病毒感染，激活细胞内的抗病毒防御机制，抑制病毒的复制和传播。IFN-β则主要由成纤维细胞产生，除了抗病毒作用外，在免疫调节和炎症反应中也发挥着重要作用，可调节免疫细胞的活性和功能，参与机体的免疫防御。

Ⅱ型干扰素仅包含IFN-γ，主要由活化的T淋巴细胞和自然杀伤细胞（NK细胞）产生。IFN-γ的免疫调节作用尤为显著，它可以增强巨噬细胞的吞噬能力和杀菌活性，促进T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖与分化，调节免疫应答的强度和方向，在细胞免疫中扮演着关键角色。

Ⅲ型干扰素主要包括IFN-λ，其生物学功能与Ⅰ型干扰素有一定的相似性，在抗病毒感染中发挥作用，特别是在黏膜免疫中具有重要意义，能够保