第十章维生素测定.pptVIP

原理核黄素在440-500nm波长光照射下发生黄绿色荧光，在稀溶液中，荧光强度与核黄素浓度成正比。在波长525nm下测定其荧光强度。试液再加入低亚硫酸钠(连二亚硫酸钠Na2S2O4),将核黄素还原成无荧光的物质，然后再测定试液中残余荧光杂质的荧光强度，两者之差即为食品中核黄素所产生的荧光强度。测定于激发波长440nm，发射波长525nm，测量样品管及标准管的荧光值。第28页，共49页，星期日，2025年，2月5日维生素B6的测定原理微生物的生长与它们对某些特定的维生素的需求有关，因此在维生素分析中，将某些微生物在含维生素的样品抽提液中的生长速率，与在含已知量维生素对照溶液中的生长速率进行对比，从而得出样品中该维生素的含量。生长速率可通过测定浊度、产酸量、质量变化或呼吸作用，测定浊度是最常用的方法。维生素B6的含量在2ng/mL以内，其浓度对卡尔斯伯酵母菌的生长速率有良好的线性关系，可以定量测定。第29页，共49页，星期日，2025年，2月5日测定在550nm波长下测定吸光度值。绘制维生素B6标准曲线，计算第30页，共49页，星期日，2025年，2月5日

（三）维生素C的测定

维生素C是一种己糖醛基酸，有抗坏血病的作用，所以又称作抗坏血酸。维生素C广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑桔等食品中含量尤丰富。维生素C具有较强的还原性，对光敏感，氧化后的产物称为脱氢抗坏血酸，仍然具有生理活性。进一步水解则生成2，3-二酮古乐糖酸，失去生理作用。第31页，共49页，星期日，2025年，2月5日VC检测技术2,6－二氯靛酚滴定法简便/须脱色、干扰多（深色、其他还原性物质）二甲苯－二氯靛酚比色法深色荧光法：准确度高，较复杂2，4-二硝基苯肼法还原型VC的测定总VC的测定总VC=氧化型VC+还原型VC+二酮古乐糖酸少氧化+还原+二酮古乐糖酸操作复杂，结果易受影响氧化型+还原型第32页，共49页，星期日，2025年，2月5日(1)2,6-二氯靛酚滴定法

1．原理还原型抗坏血酸可以还原染料2，6-二氯靛酚。该染料在酸性溶液中呈粉红色(在中性或碱性溶液中呈蓝色)，被还原后颜色消失。还原型抗坏血酸还原染料后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准染料液的量，与样品中抗杯血酸含量成正比。第33页，共49页，星期日，2025年，2月5日2、试剂⑴1%草酸溶液：称取10g草酸，加水至1000mL；⑵2%草酸溶液：称20g草酸，加水至1000mL；⑶维生素C标准液：准确称20mgVC溶于1%草酸中，并稀释至100mL，吸5mL于50mL容量瓶中，加入1%草酸至刻度，此溶液每毫升含有0.02mgVC；⑷0.02%2，6-二氯靛酚溶液：称取2，6-二氯靛酚50mg，溶于200mL含有52mg碳酸氢钠的热水中，冷却后，稀释至250mL，过滤于棕色瓶中，贮存于冰箱内，应用过程中每星期标定一次。第34页，共49页，星期日，2025年，2月5日标定一吸标液（VC）5mL于三角瓶→加6%KI溶液0.5mL→加1%淀粉3滴→用0.001molKIO3标液滴定到淡兰色。计算：抗坏血酸浓度（mg/mL）=（V1×0.088）/V2V1-滴定时消耗0.001molKIO3标液的体积（mL）V2-维生素C重量（g）0.088-1mL0.001molKIO3标液≈维生素C的量（mg/mL）第35页，共49页，星期日，2025年，2月5日LOGOLOGO第十章维生素测定第1页，共49页，星期日，2025年，2月5日维生素的测定第2页，共49页，星期日，2025年，2月5日一、概述维生素是维持人体正常生命活动所必需的一类天然有机化合物。其种类很多，目前已确认的有30余种，其中被认为对维持人体健康和促进发育至关重要的有20余种。这些维生素结构复杂，理化性质及生理功能各异，有的属于醇类，有的属于胺类，有的属于酯类，还有的属于酚或醌类化台物。第3页，共49页，星期日，2025年，2月5日维生素都具有以下共同特点：这些化合物或其前体化合物都在天然食物中存在；它们不能供给机体热能。也不是构成组织的基本原料，主要功用是通过作为辅酶的成份调节代谢过程，需要量极小；它们一般在体内不能合成，或合成量不能满足生理需要，必须经常从食物中摄取；长期缺乏任何一种维生素都会导致相应的疾病。第4页，共49页，星期日，2025年，2月5日