番茄抗叶霉病基因Cf-19：从定位到抗病应答基因筛选的深度剖析.docxVIP

番茄抗叶霉病基因Cf-19：从定位到抗病应答基因筛选的深度剖析

一、引言

1.1研究背景与意义

番茄（Solanumlycopersicum）作为全球广泛种植的蔬菜作物，在农业经济中占据重要地位。然而，番茄生产面临着多种病害的威胁，其中叶霉病（TomatoLeafMold）是一种极具破坏力的世界性病害。番茄叶霉病由番茄叶霉菌（Cladoporiumfulvum）引起，尤其在保护地栽培环境中，因其温湿度条件适宜，发病更为严重。据统计，在叶霉病流行年份，番茄产量损失可达20%-50%，严重时甚至绝收，不仅如此，叶霉病还会降低果实品质，影响其商品价值，给番茄产业带来巨大的经济损失。

长期以来，防治番茄叶霉病主要依赖化学药剂，但化学防治不仅增加生产成本，还会导致病原菌产生抗药性，破坏生态环境，威胁食品安全。利用抗病品种进行防治是最为经济、有效且环保的措施。抗病基因是培育抗病品种的核心，然而，随着现有抗病基因的广泛应用，叶霉菌生理小种不断分化，许多曾经有效的抗病基因逐渐失去抗性，如Cf-2、Cf-4和Cf-6等基因，已对某些生理小种不再具有抗性。因此，发掘新的抗病基因并深入研究其抗病机制，对于培育持久抗病的番茄品种、保障番茄产业的可持续发展具有至关重要的意义。

Cf-19基因是一个具有潜力的抗叶霉病基因，含有该基因的番茄材料在多年栽培实践中表现出有效的抗病性，有望成为抗性育种的新型候选材料。然而，目前对Cf-19基因的研究相对较少，1980年它虽被定位在2号染色体的长臂上，但此后相关研究停滞，严重阻碍了其在育种中的应用。本研究旨在对Cf-19基因进行精细定位，并筛选其抗病应答基因，深入了解该基因的抗病机制，为番茄抗病育种提供坚实的理论基础和有效的技术支持。

1.2番茄叶霉病概述

1.2.1叶霉病特征与危害

番茄叶霉病主要危害叶片，严重时也会对茎、花和果实造成影响。发病初期，叶片正面出现不规则形或椭圆形的淡黄色褪绿斑，边缘不清晰。随着病情发展，叶背面会逐渐形成棕黄色、灰紫色、灰绿色至墨绿色的茂密霉层，这是病原菌的分生孢子梗和分生孢子。在湿度较大的环境下，叶片表面的病斑也会生长出霉层。病情严重时，叶片会逐渐干枯卷曲，整株叶片呈现黄褐色干枯状态，严重影响叶片的光合作用和植株的生长发育。

茎和花染病初期，会出现水渍状小点，随后扩展成长椭圆形或长条形病斑，湿度大时病斑上会生长灰褐色霉层，最终导致茎和花逐渐枯死。果实发病时，病菌多从果蒂附近或果面侵入，形成黑色圆形或不规则形斑块，病部硬化凹陷，果实失去食用价值。番茄叶霉病不仅降低番茄产量，还严重影响果实的品质，使果实的口感、色泽和营养价值下降，给番茄种植户带来巨大的经济损失。

1.2.2病原菌Cladosporiumfulvum特性

番茄叶霉病的病原菌为Cladosporiumfulvum，中文名褐孢霉，又名黄枝孢菌，属于半知菌亚门真菌。其分生孢子梗成束从气孔伸出，稍有分支，起初无色，后期变为褐色，具有1-20个隔膜，大部分细胞上偏向一侧膨大。分生孢子串生，孢子链通常分枝，分生孢子呈圆柱形或椭圆形，起初无色，单胞，随着生长发育变为褐色，中间长出一个隔膜，形成2个细胞。

该病原菌具有明显的生理小种分化现象，目前已知的亚种分化至少已达13个。不同生理小种对番茄品种的致病性存在差异，这使得番茄叶霉病的防治变得更加复杂。病原菌以菌丝体和分生孢子梗随病残体遗落在土中存活越冬，或以分生孢子黏附在种子上越冬。在适宜的环境条件下，越冬后的病原菌产生分生孢子，借助气流传播，从气孔侵入番茄植株，引发病害。在一个生长季节中，病原菌可多次侵染番茄植株，导致病害迅速蔓延。

1.3番茄抗叶霉病基因研究进展

1.3.1已克隆抗病基因功能与应用

目前，已克隆出多个番茄抗叶霉病基因，如Cf-2、Cf-4、Cf-6、Cf-9等。这些基因在番茄抗叶霉病过程中发挥着重要作用，它们编码的蛋白产物能够识别病原菌分泌的效应子（Avr蛋白），从而激发植物的免疫反应，抵抗病原菌的侵染。

Cf-2基因编码的蛋白含有富含亮氨酸重复序列（LRR）结构域，能够特异性识别叶霉菌生理小种产生的Avr2蛋白，引发超敏反应（HR），限制病原菌的生长和繁殖。Cf-4基因编码的蛋白同样具有LRR结构域，与Avr4蛋白互作后，激活下游抗病信号通路，使番茄植株产生抗病性。在育种应用中，这些抗病基因被广泛引入番茄品种中，培育出了一系列抗叶霉病的番茄品种，在一定时期内有效地控制了叶霉病的发生和危害。

然而，随着时间的推移和病原菌的进化，这些抗病基因逐渐面临挑战。由于叶霉菌生理小种的不断分化，一些新的生理小种能够克服现有抗病基因的抗性