嵌入型CpG佐剂与融合前构象F蛋白：RSV疫苗免疫原性提升的关键策略.docxVIP

嵌入型CpG佐剂与融合前构象F蛋白：RSV疫苗免疫原性提升的关键策略

一、绪论

1.1RSV研究背景及进展

1.1.1RSV流行病学特征

呼吸道合胞病毒（RespiratorySyncytialVirus，RSV）作为引发急性呼吸道感染的常见病原体，在全球范围内广泛传播，严重威胁公共卫生。几乎所有儿童在2岁前都曾感染过RSV，其传染性约为流感的2.5倍，主要通过呼吸道飞沫和接触传播，极易在托幼机构、学校或家庭聚会等人群密集场所扩散。

RSV的感染具有明显的人群和季节特征。婴幼儿、老年人和免疫功能低下者是易感的高危人群。在婴幼儿中，RSV感染是导致新生儿出生后前6个月住院的主要病因，也是新生儿期下呼吸道感染（LowerRespiratoryTractInfections,LRTI）相关死亡的最常见原因。据2022年发表在《Lancet》的研究显示，2019年全球共有3300万起RSV相关急性下呼吸道感染病例，多发于5岁以下儿童。而随着年龄增长，特别是35岁后，RSV感染的患病风险逐步提高，每年大约3%-7%的60岁以上老年人会受到RSV感染。从地域上看，不同地区的流行季节有所差异。在北方地区，冬春季是高发期；南方地区则在冬季或潮湿雨季迎来感染高峰；热带地区多在雨季感染率较高。

RSV感染不仅对个体健康造成影响，也给社会带来了沉重的经济负担。在中国，2019年5岁以下儿童因RSV导致的急性下呼吸道感染的发病人数约为350万例，占全球10%以上，住院人数在62万至95万之间，占全球该类住院人数的17%至24%，在全球范围内排名第二。美国每年约有58000-80000名5岁以下儿童和60000-160000名65岁及以上成人因RSV感染住院。新冠疫情的爆发打乱了RSV原有的季节性流行模式，未来其季节性模式尚不明确，这也为防控工作带来了更大的挑战。

1.1.2RSV病毒结构剖析

RSV属于肺炎病毒科正肺病毒属，其病毒粒子包含10个基因，编码11种蛋白质，其中SH、G和F蛋白是病毒感染呼吸道细胞的关键，也是药物研发的重要靶点。RSV的基因组为非节段性单股负链RNA，全长约15.2kb。

F蛋白作为RSV最重要的表面糖蛋白，在病毒感染过程中发挥着关键作用。它是典型的I型糖蛋白，最初表达为单一多肽前体F0，F0在内质网中三聚化，并在两个保守位点由细胞弗林蛋白酶样蛋白酶加工，产生F1、F2和pep27多肽，其中pep27多肽被切除，不形成成熟F蛋白的一部分。F2多肽通过两个二硫键与F1多肽连接，F1多肽则通过跨膜结构域将成熟F蛋白锚定在膜中，与约24个氨基酸的胞质尾连接。F蛋白可以介导RSV病毒颗粒与宿主受体结合，帮助病毒颗粒进入宿主细胞，同时还能引起病毒感染细胞与周围细胞的融合，形成合胞体。F蛋白基因在RSVA及RSVB亚型中高度保守，针对F蛋白的抗体可同时对RSVA、B产生交叉反应，因此F蛋白是疫苗和药物开发的重要靶点。

G蛋白是RSV的表面糖蛋白之一，属于II型糖蛋白，在病毒附着中起主要作用，可介导病毒进入宿主细胞内。G蛋白也是RSV变异最大的蛋白，根据G蛋白抗原性及基因差异，可将RSV分为A、B两个不同的亚型，在A、B亚型中，由于位于G蛋白C末端的第二高变区的变异，又可进一步细分为各种基因型。

除F蛋白和G蛋白外，RSV还编码其他蛋白，如小疏水蛋白SH，虽然其功能尚未完全明确，但已知它可以改变宿主细胞膜的通透性，在病毒合胞体的形成中也起到一定作用。核衣壳蛋白N、磷蛋白P、基质蛋白M等也各自承担着重要功能，它们参与病毒的组装、转录、复制等过程，共同维持着RSV的生命周期和感染能力。

1.1.3RSV疫苗研究现状

RSV疫苗的研发历程充满坎坷，自1956年首次从黑猩猩呼吸道中分离出RSV病毒后，相关疫苗研发工作便已开启。上世纪60年代初，辉瑞开发的福尔马林灭活RSV疫苗（FI-RSV）在临床试验中失败，接种疫苗的婴儿在自然感染RSV后出现呼吸道疾病加重的情况，引发严重肺部炎症反应，导致部分患儿住院甚至死亡，这一挫折使得RSV疫苗研发陷入停滞。

近年来，随着对RSV病毒结构和免疫反应的深入了解，RSV疫苗研发取得了显著进展。目前的研发主要集中在减毒活疫苗、载体疫苗、亚单位疫苗、颗粒疫苗和mRNA疫苗等方向。

减毒活疫苗通过滴鼻免疫，可激活黏膜免疫，阻断RSV感染，适用于新生儿免疫。早期