生物化学实验技能考试题库及答案精选.docxVIP

生物化学实验技能考试题库及答案精选

一、选择题

蛋白质分子量的测定通常使用的方法是（）

A.紫外分光光度法

B.毛细管电泳法

C.超速离心法

D.质谱法

答案：D

解析：质谱法通过测定蛋白质的质荷比（m/z）直接确定分子量，是当前最精准的方法。

在酶动力学实验中，米氏常数（Km）表示（）

A.酶的最大反应速率

B.酶的催化效率

C.底物浓度达到酶活性50%时的浓度

D.酶的亲和力

答案：C

解析：Km是酶促反应速率达到最大速率一半时的底物浓度，反映酶与底物的亲和力，Km值越小亲和力越强。

核酸杂交技术中，常用的探针是（）

A.RNA探针

B.DNA探针

C.蛋白质探针

D.抗体探针

答案：B

解析：DNA探针因稳定性高、制备简便，是核酸杂交（如Southernblot、Northernblot）的首选。

细胞内信号转导的第三信使通常是（）

A.蛋白激酶

B.G蛋白

C.cAMP

D.钙离子

答案：C

解析：第三信使指在细胞内传递信号的小分子物质，如cAMP、IP3等，负责将细胞外信号转化为细胞内应答。

在蛋白质组学研究中，常用的分离技术是（）

A.气相色谱法

B.液相色谱法

C.电泳法

D.质谱法

答案：C

解析：二维电泳（2-DE）结合等电聚焦和SDS，可分离复杂蛋白质混合物，是蛋白质组学的核心技术。

生物化学实验中，常用的缓冲溶液是（）

A.乙酸钠缓冲液

B.磷酸缓冲液

C.氢氧化钾溶液

D.盐酸溶液

答案：B

解析：磷酸缓冲液（PBS）因pH稳定性高、对生物分子无毒性，广泛用于酶反应、细胞培养等。

在糖酵解过程中，葡萄糖转化为丙酮酸的关键酶是（）

A.磷酸化酶

B.糖酵解酶（如己糖激酶、磷酸果糖激酶）

C.柠檬酸合成酶

D.烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶

答案：B

解析：糖酵解的限速酶包括己糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶，催化不可逆反应。

在脂质合成过程中，脂肪酸的合成起始物质是（）

A.乙酰辅酶A

B.丙酮酸

C.柠檬酸

D.草酰乙酸

答案：A

解析：脂肪酸合成起始于乙酰辅酶A，通过脂肪酸合成酶复合体逐步延伸碳链。

在DNA复制过程中，引物的合成是由（）

A.DNA聚合酶

B.RNA聚合酶

C.解旋酶

D.聚合酶链式反应（PCR）

答案：A

解析：DNA复制时，DNA聚合酶需引物（RNA片段）提供3-OH末端，引物由引发酶（一种RNA聚合酶）合成。

在蛋白质折叠过程中，起到关键作用的是（）

A.分子伴侣

B.蛋白激酶

C.G蛋白

D.钙离子

答案：A

解析：分子伴侣（如Hsp70家族）协助蛋白质正确折叠，防止错误构象形成。

二、填空题

蛋白质分子量的测定通常使用_______法。

答案：质谱

解析：质谱法（如MALDI-TOF）是高精度测定蛋白质分子量的主流技术。

在酶动力学实验中，米氏常数（Km）表示_______。

答案：底物浓度达到酶活性50%时的浓度

解析：Km是酶与底物亲和力的量化指标，与酶的催化效率无关。

核酸杂交技术中，常用的探针是_______。

答案：DNA探针

解析：DNA探针可通过PCR或化学合成制备，用于检测特定核酸序列。

细胞内信号转导的第三信使通常是_______。

答案：cAMP（或其他第二信使如IP3、DAG）

解析：第二信使在细胞内传递信号，常见类型包括cAMP、钙离子、IP3等。

在蛋白质组学研究中，常用的分离技术是_______。

答案：电泳法（或二维电泳）

解析：二维电泳结合等电点和分子量差异，可分离数千种蛋白质。

生物化学实验中，常用的缓冲溶液是_______。

答案：磷酸缓冲液（PBS）

解析：PBS的pH范围（6.0-8.0）适用于多数生化反应，且对细胞无毒性。

在糖酵解过程中，葡萄糖转化为丙酮酸的关键酶是_______。

答案：己糖激酶、磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶

解析：这三种酶催化糖酵解的不可逆步骤，是调控代谢流的关键。

在脂质合成过程中，脂肪酸的合成起始物质是_______。

答案：乙酰辅酶A

解析：乙酰辅酶A是脂肪酸合成的基本单位，通过丙二酸单酰辅酶A逐步延伸碳链。

在DNA复制过程中，引物的合成是由_______。

答案：DNA聚合酶（或引发酶）

解析：DNA复制需RNA引物，由引发酶（一种RNA聚合酶）合成。

在蛋白质折叠过程中，起到关键作用的是_______。

答案：分子伴侣

解析：分子伴侣通过结合未折叠肽链，促进正确构象形成。

三、简答题

简述蛋白质分子量的测定方法及其原理

答案：

质谱法：将蛋白质离子化后，根据质荷比（m/z）分离并检测，直接计算