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病理标本处理操作流程指导

CATALOGUE

目录

01

标本接收与登记

02

标本固定操作

03

标本脱水与包埋

04

切片制备技术

05

染色与封片

06

质量保证与归档

01

标本接收与登记

核查标本是否在规定的保存条件下送达，如冷藏标本需确保温度记录符合要求，冷冻标本需无融化迹象。

时效性验证

根据申请单核对标本类型（如血液、组织、体液等），确保与检测项目匹配，避免因类型错误导致检测失败。

标本类型核对

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确认标本容器无破损、渗漏或污染，确保标签与申请单信息一致，避免因运输导致的标本失效或交叉污染。

完整性检查

检查标本是否属于高危类别（如传染性病原体），需立即标记并转移至专用生物安全区域处理。

生物安全评估

接收前检查标准

信息登记规范

由两名工作人员同步核对标本标签与申请单信息，包括患者姓名、唯一标识号、检测项目等，确保零误差录入系统。

双人核对制度

对不符合接收标准的标本（如量不足、容器错误），需在系统中详细标注原因并通知送检方，留存书面沟通记录。

异常记录标注

采用条码扫描或电子表单录入，减少手动输入错误，系统自动校验逻辑矛盾（如性别与检测项目的兼容性）。

电子化录入要求

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所有登记信息需实时同步至云端服务器，并启用分级权限管理，确保患者隐私符合数据保护法规。

数据备份与加密

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每个标本需粘贴主标签（含患者姓名、ID号）和副标签（含检测条码、批次号），标签材质需防水防冻。

根据标本类型或优先级使用不同颜色标签（如红色为急诊、黄色为高危标本），便于快速分拣和处理。

采用国际标准编码（如ISO8601格式条码），避免重复或混淆，标签信息需机器可读且永久清晰。

对标签脱落的标本，需启动追溯流程（如通过容器编号查询原始信息），并在系统中标记“待确认”状态直至复核完成。

标本标识方法

双重标识系统

颜色编码管理

唯一性标识规则

破损应急流程

02

标本固定操作

固定液选择原则

根据组织特性选择固定液，如甲醛适用于大多数组织，而特殊组织（如神经组织）需选用戊二醛等专用固定液以保持结构完整性。

适配组织类型

优先选择渗透性强且化学性质稳定的固定液，确保组织内外均匀固定，避免因固定不均导致后续染色差异。

确保固定液不影响后续分子检测（如PCR、免疫组化），避免因固定剂残留导致假阴性或假阳性结果。

渗透性与稳定性

考虑固定液的毒性和废弃处理难度，优先选用低毒、易中和的环保型固定剂，减少实验室人员健康风险。

环保与安全性

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兼容后续检测

固定时间控制

常规组织块厚度应控制在0.5cm以内，过厚会导致固定液渗透不足，过薄可能引起组织变形或过度收缩。

标准组织厚度

低温环境下需延长固定时间，高温则需缩短并密切观察，防止组织自溶或过度硬化。

温度影响修正

根据组织密度（如脂肪或纤维组织）调整固定时间，高密度组织需延长固定时间，必要时进行中间切割辅助渗透。

动态监测调整

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对复杂标本（如含骨或钙化组织）采用分阶段固定，先表面快速固定后深层渗透，确保整体质量。

多步骤固定策略

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固定质量评估

颜色与质地检查

通过预切片评估组织是否易碎或分层，理想状态应为连续、平整的切片，无刀痕或裂隙。

切片性能测试

分子完整性检测

病理医师反馈

合格固定组织应呈现均一颜色（如灰白色），质地适中，过硬提示过度固定，过软可能固定不足或腐败。

采用核酸/蛋白提取实验验证固定效果，如DNA电泳条带清晰无降解，表明固定条件适宜。

结合HE染色结果判断细胞核与胞浆结构是否清晰，核质比是否正常，排除固定artefact干扰诊断。

03

标本脱水与包埋

根据组织类型和厚度，合理设置乙醇脱水梯度（如70%、80%、95%、100%），确保组织内水分被逐步置换，避免细胞收缩或变形。需注意脂肪组织需延长高浓度乙醇处理时间。

脱水梯度设置

梯度浓度选择

不同浓度乙醇的浸泡时间需精确控制，常规组织每梯度脱水1-2小时，致密组织（如子宫肌瘤）需延长至3-4小时，并辅以震荡促进渗透。

脱水时间控制

脱水后需使用二甲苯等透明剂置换乙醇，透明时间以组织呈半透明状为基准，通常30-60分钟，避免过度透明导致组织脆化。

透明剂过渡

石蜡熔点匹配

选择熔点为56-58℃的石蜡，确保其渗透性与组织硬度平衡。高温蜡（60℃以上）可能导致组织收缩，低温蜡则易软化。

浸蜡温度与时间

蜡浴温度需恒定在高于熔点2-3℃，浸蜡分2-3次进行，每次1-2小时，厚组织需延长至3小时以上，并真空辅助去除气泡。

蜡液纯度维护

定期过滤石蜡去除杂质，避免残留透明剂影响蜡液渗透性，每次浸蜡前需预温组织以减少温度骤变损伤。

浸蜡技术要点

包埋模具使用

模具选择标准

根据组织大小选用金属或塑料模具，确保边缘密封性。小组