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磷酸酶2A对线粒体自噬的影响及其抗氧化损伤作用

目录

一、内容概括．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1磷酸酶2A概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.2线粒体自噬与抗氧化损伤的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.3研究磷酸酶2A对线粒体自噬及抗氧化损伤作用的意义．．．．．．．．．6

二、文献综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

2.1磷酸酶2A的研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

2.1.1磷酸酶2A的结构与功能．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

2.1.2磷酸酶2A与细胞信号转导的关系．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

2.2线粒体自噬的研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

2.2.1线粒体自噬的定义及过程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

2.2.2线粒体自噬的调控机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

2.3抗氧化损伤的研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

2.3.1氧化损伤的概念及机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

2.3.2抗氧化损伤的策略与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

三、研究方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

3.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

3.1.1细胞系选择及培养．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

3.1.2试剂与仪器．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

3.2实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

3.2.1细胞处理与分组．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

3.2.2磷酸酶2A活性的检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

3.2.3线粒体自噬的观测与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

3.2.4抗氧化损伤实验的开展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

3.2.5数据统计与分析方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

四、实验结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

4.1磷酸酶2A对线粒体自噬的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

4.1.1不同条件下磷酸酶2A活性的变化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

4.1.2磷酸酶2A对线粒体自噬过程的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44

4.1.3磷酸酶2A对线粒体自噬相关基因表达的影响．．．．．．．．．．．．．．45

4.2磷酸酶2A的抗氧化损伤作用研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46

4.2.1氧化应激模型的建立及验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48

4.2.2磷酸酶2A对细胞内氧化应激水平的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．52

4.2.3磷酸酶2A对细胞抗氧化能力的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．53

五、讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．54

5.1磷酸酶2A影响线粒体自噬的可能机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．55

5.2磷酸酶2A抗氧化损伤的作用机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．60

5.3本研究的创新点与局限性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．61

六、结论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．62

一、内容概括

本文围绕磷酸酶2A（PP2A）对线粒体自噬的影响及其抗氧化损伤