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I.什么是组织学(Histology)?
组织学是研究人体正常细微结构及其相关功能的科学。
A.微观结构:
1.光学显微镜(Lightmicroscope,LM):计量单位是微米(μm)。
(1μm=0.001mm)。
2.电子显微镜(Electronmicroscope,EM):计量单位是纳米(nm)。
(1nm=0.001μm)。;B.相关功能:
微观结构和其功能相适应,反之亦然。
C.人体结构的4个层次:
1.细胞(Cell):人体结构的基本结构和功能单位。
2.组织(Tissue):由一群结构和功能相同或相似的
细胞(及其细胞间质)构成。人体内有4种基
本组织:上皮组织,结缔组织,肌组织和
神经组织。
3.器官(Organ):由组织有机地结合起来而构成。
4.系统(System):由结构相似且功能相关的器官构
成。;2.组织学的研究方法;b.石蜡包埋(Paraffinembedding):
*脱水(Dehydration):用浓度逐渐升高的酒精(70~100%)将组织中的水完全置换出来。
*透明(Clearing):用二甲苯完全置换出酒精。
*浸蜡(Infiltration):在60~62?C时,用液态石蜡完全置换出二甲苯。室温时石蜡凝固成固态,内含待切组织。;c.切片:
用切片机将组织切成1~20μm厚的蜡片,然后将其放到温水上,待其完全展开后,裱到有粘附剂的载玻片上。;d.染色(Staining):
染料可以将微观结构显示不同的颜色以便观察鉴别。在染色前,需要脱蜡入水,因为染料是水溶性的。;2.其他处理组织的方法:
*铺片(Wholemount):用于很薄的组织,如肠系膜。
*磨片(Groundsection):用于很坚硬的组织,如骨和牙。
*涂片(Smear):用于液态组织,如血液,精液和唾液。;B.EM技术:
1.EM可分为透射电镜(TEM)和扫描电镜(SEM)2类。
2.EM的原理和LM相似,但用电子束代替光线,磁场代替玻璃透镜。分辨率约为0.2nm。;TEM显示胰腺腺泡细胞内部结构。;C.组织化学(Histochemistry,细胞化学)法:通过生物化学的方法在原位产生不溶解的有颜色的反应产物,来显示微细结构的位置,然后用显微镜观察。
PAS反应:用来显示多糖的分布。先用过碘酸(Periodicacid)将多糖氧化,在多糖表面形成戊二醛结构,然后用无色亚硫酸品红(Schiff试剂)还原戊二醛形成紫红色沉淀。;肝脏的PAS染色;D.免疫细胞化学(Immunocytochemistry)染色法:
a.待测结构或化学物质被看作抗原(Antigen),通过非常敏感和专一的免疫反应使抗原和被标记的抗体(Antibody)结合,然后显示标记物,在原位产生不溶、有色的反应产物,最后用显微镜观察。;E.放射自显影(Autoradiography):
给细胞所要代谢的物质分子上标记放射性物质如I125等,间隔照相,从而追踪该物质代谢途径。;2.细胞连接:;电镜结构。
(1)紧密连接(Tightjunction):
a.带状。相邻细胞的细胞膜内蛋白质“嵴”相贴。细胞膜融合。
b.封闭10nm宽的胞间隙。
c.常存在于体内各种屏障内。;(2)中间连接(Intermediatejunction):
a.带状。常分布于紧密连接下方。
b.20nm宽的胞间隙两侧的胞膜内有电子致密斑附着。
c.由终末网内发出的微丝插入致密斑。
d.粘着相邻细胞。;(3)桥粒(Desmosome):
a.盘状,很牢固。
b.30nm宽的胞间隙内有电子致密的中间线。胞膜内侧有附着板。两者由跨膜细丝相连。
c.大量“U”形的张力丝穿入附着板。
桥粒在表皮细胞间大量存在,构成细胞间桥。;(4)缝隙连接(Gapjunction):
a.有2~3nm胞间隙。常群居。
b.相邻胞膜上的直径8nm的柱状蛋白质颗粒(Connexons,由6个亚基构成)相贴,中间留有1.5nm的亲水性通道。
c.信息交换:分子量小于1500Da的信息分子可以通过该通道。
连接复合体(Junctionalcomplex):由两种或两种以上的连接排列在一起构成。;3.细胞游离面的特殊结构;(2)纤毛(Cilia)
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