细菌和病毒的遗传.ppt

第七章细菌和病毒的遗传;遗传学研究从经典水平发展到细胞水平，一个重要的条件是Morgan利用了果蝇这个模式试验材料。;第一节细菌和病毒遗传研究的意义;一、细菌的生物学特征;其DNA主要是以单个主染

色体(mainchromosome)的形

式存在。;二、病毒的生物学特征;细菌病毒又称为噬菌体（phage）。噬菌体是研究得比较清楚的病毒。;病毒的特性;三、细菌和病毒在遗传研究中的优越性;3.便于研究基因突变;5.便于研究基因重组;7.便于用作研究基因结构、功能及调控机制

的材料;四、细菌遗传的实验研究方法;(一)细胞计数(培养物细胞浓度);(二)建立纯系的方法—纯培养;(三)选择培养法鉴定突变型与重组型;(四)突变型与重组型的批量筛选方法;影印培养法;第二节噬菌体的遗传分析;噬菌体的遗传分析;一、烈性噬菌体;;二、温和噬菌体;λ噬菌体DNA附着于大肠

杆菌染色体的gal和bio位点

之间的attλ(attachmentsite)座位

上；;λ噬菌体DNA随细菌染色体的复制而复制，每个子细胞中有一个拷贝。;P1噬菌体与λ不同，它并

不整合到细菌的染色体上，

而是独立地存在于它的细胞

质内。;三、噬菌体的基因重组与作图;T2噬菌体双重感染;将亲本型和重组型混合子代;重组值的计算：;不同速溶性噬菌体的突变型在表现型上有所不同，可分别写成ra、rb、rc等;可能的基因排列连锁图：;λ噬菌体的基因重组与作图();凯泽利用噬菌体sco1mi与噬菌体+++进行杂交作图;第三节细菌的遗传分析;(一)细菌转化实验;Griffith转化研究（1928年）;Griffith对其试验结论;Avery的转化实验(1944年);实验结论;转化的概念;(二)细菌转化的条件;2）转化片段的大小：;;细菌转化中DNA的整合过程;(三)共转化与遗传图谱绘制;转化与遗传图谱;转化与遗传图谱;黎德伯格和塔特姆的实验;上述实验中的原养型菌落是否是由于转化作用所致呢？;戴维斯(Dawis,1950)的U型管试验：;二、接合(conjugation);(一)F因子及其在杂交中的行为;F因子的存在状态;具有F因子的菌株可作为供体，因为F因子中有控制F性伞毛(Fpillus)形成的基因。;;;部分二倍体的重组;;(三)中断杂交试验作图;将两种细胞混合培养，每隔一定时间取样，把菌液放在食物搅拌器内搅??，以中断接合；;在检查F-细胞是否得到thr+:;在被选择的thr+leu+的重组体中，其它的供体基因接连出现，不同的基因经过一定时间就上升到一个稳定的水平。;上述事实说明，Hfr菌株的基因是按一定的线性顺序依次进入F–菌株的，染色体从原点以直线方式进入F–细胞。基因位点离原点愈近，进入F–细胞愈早，反之则晚。;用不同的Hfr菌株进行中断杂交实验所作出的大肠杆菌基因连锁图，其基因向F-细胞转移的顺序大不相同。;所有的his基因都有gal在一边，gly在另一边。其他基因也是如此，除非它们在连锁群的另一端。;中断杂交试验作图的问题;将Hfr和F–接入完全培养基中混合培养；;部分染色体DNA与FDNA的杂合环称为F‘因子。;三、性导(sexduction);第一，不同的F′因子带有不同的细菌DNA片段，利用不同的F′的性导可以测定不同基因在一起转移的频率。;鼠伤寒沙门氏菌A菌株

phe－trp－tyr－met﹢his﹢;将两种菌株分别放在U型管的两臂内，中间用玻璃滤板隔开，以防止细胞直接接触，但可以允许比细菌小的物质通过；;是否是转化：;进一步研究证明，FA是一种噬菌体，称为P22，它对亲本菌株之一是溶源性的；;四、转导(transduction);（一）普遍性转导;由此形成的具有重组遗传结构的细菌细胞叫做

转导体(transductant)。;利用合转导率确定基因之间的顺序和距离;例:;对每个选择的标记基因进行多次实验，以确定其未选择标记基因出现的频率；;利用上述实验可以说明三个位点之间的连锁关系。;普遍性转导判断转导片段的大小;如果研究三因子转导(three-factortransduction)，

只需分析一个实验的结果就可以推出三个基因的

次序。;然后，再把被选择的受体细胞重复接种在其他对b+或c+进行选择的选择培养基上，检查a+细胞是否同时具有b+和c+。;假定由实验得到的最少的转导体类别为a+b+c-，那么就可以确定，这三个基因的正确次序应当是;推算基因之间的物理距离;d=同一染色体上两基因之间的物理距离。;在普遍性转导中，供体大肠杆菌细胞的基因型是trpC+pyrF-trpA-，受体细胞的基因型是trpC-pyrF+trpA+。由P1噬