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药学-中药鉴定学(皮类和茎木类药材)茎木类药材DNA鉴别试题及答案

药学-中药鉴定学(皮类和茎木类药材)专题文档

（一）考查目的与理论基础

1.考查目的

本部分主要针对药学院本科/研究生及药师考试，系统讲解皮类和茎木类药材的鉴定方法，重点掌握DNA指纹图谱技术在药材真伪鉴别中的应用。通过学习，学生应能够：

-掌握皮类和茎木类药材的性状、显微、理化等传统鉴别方法。

-熟悉DNA指纹图谱技术的基本原理、操作流程及在药材鉴定中的优势。

-能够对比常见真伪品与混淆品的鉴别特征。

-理解DNA鉴定的临床应用价值及产地差异对结果的影响。

2.理论基础

DNA指纹图谱技术（DNABarcoding）是基于核糖体DNA（rDNA）、叶绿体DNA（cpDNA）或基因组DNA的特异性序列，通过PCR扩增和测序，构建药材的分子身份证。该方法具有以下优势：

-高特异性：能够区分近缘种和变异性强的药材。

-稳定性：不受环境影响，结果可靠。

-全面性：可同时鉴别药材基源、产地及掺伪情况。

（二）核心知识点总结

1.皮类药材

皮类药材主要来源于植物茎或根的次生皮层，如厚朴、黄柏、杜仲等。其鉴别要点包括：

-性状：色泽、纹理、气味、折断性等。

-显微：纤维、石细胞、淀粉粒、导管等特征。

-理化：荧光反应、化学试剂测试（如盐酸镁粉反应）。

2.茎木类药材

茎木类药材主要来源于植物茎的木质部或韧皮部，如牡丹皮、肉桂、降香等。其鉴别要点包括：

-性状：木材结构、树皮厚度、气味等。

-显微：木射线、导管、树胶道等特征。

-理化：香豆素类成分的检识、荧光反应。

（三）具体鉴别方法

1.性状鉴别

-皮类：厚朴的“内表面暗紫色或紫褐色，有亮光，具明显油点”；黄柏的“断面呈裂片状，黄绿色或黄色”。

-茎木类：牡丹皮的“呈淡灰褐色或淡紫色，内表面有紫色斑点”；肉桂的“外皮灰黄色，内表面红棕色，有光”。

2.显微鉴别

-皮类：厚朴的石细胞单个散在或数个成群，壁厚；黄柏的纤维成束，石细胞类圆形。

-茎木类：牡丹皮的木射线宽，导管单列；肉桂的树胶道散在或数个相聚。

3.理化鉴别

-荧光反应：厚朴的“内表面在紫外灯下显紫色荧光”；黄柏的“断面在紫外灯下显黄色荧光”。

-化学试剂：牡丹皮的“盐酸镁粉反应阳性”。

4.薄层色谱（TLC）

-皮类：厚朴的“厚朴酚、和厚朴酚斑点清晰”。

-茎木类：肉桂的“桂皮醛斑点明显”。

5.高效液相色谱（HPLC）

-皮类：黄柏的“小檗碱含量≥70%”。

-茎木类：牡丹皮的“丹皮酚含量≥50%”。

6.红外光谱（IR）

-皮类：厚朴的“特征峰在1650、1600cm?1处”。

-茎木类：肉桂的“特征峰在2920、1640cm?1处”。

7.DNA指纹图谱技术

-操作流程：

1.样本制备：取药材粉末，提取基因组DNA。

2.PCR扩增：选择特异性引物（如ITS、rbcL）扩增DNA片段。

3.电泳分析：通过琼脂糖凝胶或毛细管电泳检测扩增产物。

4.序列比对：与数据库比对，确定药材基源。

（四）常见真伪品与混淆品对比表

|药材名称|原植物来源|特征鉴别|DNA鉴定结果|

|----------------|-------------------|-----------------------------|-------------------------|

|真品||||

|厚朴|Magnoliaofficinalis|内表面紫褐色，油点明显|特异性ITS序列存在|

|黄柏|Phellodendronamurense|断面黄绿色，纤维成束|特异性ITS序列存在|

|伪品/混淆品||||

|混淆品1|其他木兰科植物|内表面颜色较浅，油点稀疏|ITS序列差异|

|掺伪品2|合成材料|无油点，无荧光反应|无特异性序列或序列模糊|

|真品||||

|牡丹皮|Paeoniasuffruticosa|内表面紫色斑点，木射线宽|特异性rbcL序列存在|

|肉桂|Cinnamomumcassia|外皮灰黄，内表面红棕|特异性ITS序列存在|

|伪品/混淆品||||

|混淆品3|其他芍药科植物|斑点稀疏，木射线窄|rbcL序列差异|

|掺伪品4|植物油染色|模拟纹理，无荧光反应|无特异性序列或序列模糊|

（五）试题部分

单选题

1.厚朴的DNA指纹图谱中，特异性序列主要来源于（）。

A.叶绿体DNA

B.核糖体DNA

C.基因组DNA

D.线粒体DNA

答案：B

解析：厚朴的DNA指纹图谱主要基于核糖体DNA（ITS）的特异性序列。

2.下列哪项不是牡丹皮理化鉴别的特征？（）

A.盐酸镁粉反应阳性

B.紫外灯下显紫色荧光

C.断面呈裂片状

D.纤维成束

答案：D

解析：纤维成束是显微鉴别特征，而非理化鉴别。

3.肉桂的DNA鉴定中，常用的引物是（）。

A.18S-26SrDN