发酵液中杂质的去除生物制品分离提取84课件.pptxVIP

生物制品分离提取发酵液中杂质的去除主讲人：杨琪

发酵液的特性微生物发酵液的成分极为复杂，其中除了所培养的微生物菌体及残存的固体养基外，还有未被微生物完全利用的糖类、无机盐、蛋白质，以及微生物的各种代谢产物。其特性有以下几点：（1）发酵产物浓度较低。（2）悬浮物颗粒小。（3）固体粒子可压缩性大。（4）液相黏度大。（5）性质不稳定，随时间变化，易受空气氧化、微生物污染、蛋白酶水解等作用的影响。（6）成分复杂，杂质较多。

发酵液过滤特性的改变降低液体黏度调整PH加入反应剂加入助滤剂

1.降低液体黏度发酵液过滤特性的改变根据流体力学原理，滤液通过滤饼的速率与液体的粘度成反比，可见降低液体粘度可有效提高过滤速率。降低液体粘度的常用方法有加水稀释法和加热法等。采用加水稀释法虽能降低液体粘度，但会增加悬浮液的体积，加大后继过程的处理任务。而且，单从过滤操作看，稀释后过滤速率提高的百分比必须大于加水比才能认为有效，即若加水一倍，则稀释后液体的粘度必须下降50%以上才能有效提高过滤速率。

发酵液过滤特性的改变2.调整PHpH值直接影响发酵液中某些物质的电离度和电荷性质，适当调节pH值可改善其过滤特性。此法是发酵工业中发酵液预处理较常用的方法之一。对于氨基酸、蛋白质等两性物质，在酸性条件下带正电荷，在碱性条件下带负电荷，而在某一pH值下，净电荷为零，称为等电点。在等电点下，两性物质的溶解度最小，此即为等电点沉淀法。如味精生产中，利用等电点（pH3.22）沉淀法提取谷氨酸。对于蛋白质，由于羧基的电离度比氨基大，故蛋白质的酸性性质通常强于碱性，因而大多数蛋白质的等电点都在酸性范围内（pH4.0-5.5）。

发酵液过滤特性的改变3.加入反应剂加入反应剂和某此可溶性盐类发生反应生成不溶性沉淀，如CaSO4、AlPO4等。生成的沉淀能防止菌丝体粘结，使菌丝具有块状结构，沉淀本身可作为助滤剂，并且能使胶状物和悬浮物凝固，从而改善过滤性能。①如在新生霉素发酵液中加入氯化钙和磷酸钠，生成的磷酸钙沉淀可充当助滤剂，另一方面可使某些蛋白质凝固。②又如环丝氨酸发酵液用氧化钙和磷酸处理，生成磷酸钙沉淀，能使悬浮物凝固，多余的磷酸根离子还能除去钙、镁离子，并且在发酵液中不会引入其他阳离子，以免影响环丝氨酸的离子交换吸附。正确选择反应剂和反应条件，能使过滤速率提高3-10倍。

发酵液过滤特性的改变4.加入助滤剂助滤剂是一种不可压缩的多孔微粒，它能使滤饼疏松，滤速增大。这是因为充当过滤介质的助滤剂表面具有吸附胶体的能力，并且由此助滤剂颗粒形成的滤饼具有格子型结构，不可压缩，滤孔不会被全部堵塞，可以保持良好的渗透性，既能使悬浮液中细小颗粒状胶态物质截留在格子骨架上，又能使清液有流畅的通道。所以使用惰性助滤剂能大大提高过滤能力和生产效率，改善滤液澄清度，降低过滤成本。常用的助滤剂有硅藻土、纤维素、石棉粉、珍珠岩、白土、炭粒、淀粉等，其中最常用的是硅藻土。助滤剂的使用方法有两种：一种是在过滤介质表面预涂助滤剂，另一种是直接加入发酵液，也可两种方法同时兼用。硅藻土炭粒石棉粉珍珠岩

高价无机离子的去除发酵液中主要的无机离子有Ca2+、Mg2+和Fe3+等。（1）钙离子的去除，通常使用草酸。但草酸溶解度较小，故用量大时，可用其可溶性盐（如草酸钠）。反应生成的草酸钙还能促使蛋白质凝固，改善发酵液的过滤性能。但草酸价格较贵，应注意回收。如四环类抗生素废液中，加入硫酸铅，在60℃下反应生成草酸铅。后者在90-95℃下用硫酸分解，经过滤、冷却、结晶后可以回收草酸。

高价无机离子的去除（2）草酸镁的溶解度较大，而且发酵液中Mg2+的浓度一般不是很高，加入草酸不能除尽镁离子。要除去镁离子，可以加入三聚磷酸钠Na5P3O10，它和镁离子形成可溶性络合物：（3）用磷酸盐处理，也能大大降低钙离子和镁离子的浓度。要除去铁离子，可加入黄血盐，使形成普鲁士蓝沉淀：

杂蛋白质的去除沉淀法01变性法02吸附法03

杂蛋白质的去除1.沉淀法蛋白质是两性物质，在酸性溶液中，能与一些阴离子如三氯乙酸盐、水杨酸盐、钨酸盐、苦味酸盐、鞣酸盐、过氯酸盐等的酸根离子形成沉淀；在碱性溶液中，能与一些阳离子如Ag+、Cu2+、Zn2+、Fe3+和Pb2+等形成沉淀。

杂蛋白质的去除2.变性法蛋白质从有规则的排列变成不规则结构的过程称为变性，变性蛋白质的溶解度较小。使蛋白质变性的方法很多，其中最常用的是加热法。加热不仅使蛋白质变性，同时降低液体粘度，提高过滤速率。例如，将柠檬酸发酵液加热至80℃以上，使蛋白质变性凝固和降低发酵液粘度，即可大大提高过滤速率。使蛋白质变性的其他方法有：大幅度调节pH，加酒精、丙酮等有机溶剂或表面活性剂等。

杂蛋白质的去除2.变性法如在抗生素生产中，常将发酵液pH调至偏酸性范围（pH2-