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梨星毛虫性信息素酶基因的鉴定和功能研究
目录
一、文档简述...............................................2
1.1研究背景与意义.........................................3
1.2国内外研究进展.........................................4
1.3研究目标与内容.........................................6
1.4技术路线与实验方案.....................................8
1.5本研究的创新点.........................................9
二、梨星毛虫性信息素酶基因的克隆与序列分析................10
2.1实验材料..............................................12
2.2总RNA提取与cDNA合成...................................13
2.3基因克隆与全长序列获得................................14
2.4生物信息学特性分析....................................16
三、梨星毛虫性信息素酶基因的时空表达特征..................19
3.1组织表达特异性分析....................................21
3.2发育时期表达动态分析..................................23
3.3性信息素诱导下的表达响应..............................25
四、梨星毛虫性信息素酶基因的原核表达与蛋白纯化............27
4.1原核表达载体的构建....................................28
4.2重组蛋白的诱导表达条件优化............................33
4.3重组蛋白的纯化与鉴定..................................34
五、梨星毛虫性信息素酶的体外酶学功能研究..................36
5.1酶学性质分析..........................................38
5.2底物特异性与催化效率测定..............................42
5.3酶促产物GC-MS鉴定.....................................45
六、梨星毛虫性信息素酶基因的功能验证......................47
6.1基因沉默技术构建......................................50
6.2基因沉默对性信息素合成的影响..........................51
6.3基因沉默对交配行为的影响..............................52
七、讨论..................................................56
7.1基因序列特征与进化地位分析............................56
7.2时空表达模式的功能意义................................58
7.3酶学特性与性信息素合成的关联性........................60
7.4基因功能验证的生物学启示..............................63
7.5研究不足与未来展望....................................64
八、结论..................................................65
8.1主要研究结果总结......................................67
8.2研究的理论与应用价值..................................68
一、文档简述
梨星毛虫(Cydiapomonella)作为苹果等fruit作物上的重要蛀果类害虫,其繁殖与危害给农业生产带来了显著的经济损失。近年来,随着生物技术在国内外的飞速发展,针对植食性害虫的控制措施也逐渐向精确定位、高效低毒的方向转变,而昆虫信息素酶在其中发挥着关键作用。本文主要围绕梨星毛虫性信息素酶基因的识别
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