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2025年微生物检验技术初级士（专业实践能力）历年参考题库含答案详解

一、选择题

从给出的选项中选择正确答案（共50题）

1、高压蒸汽灭菌法的标准条件是？

A.100℃，30分钟

B.121℃，15-30分钟

C.90℃，20分钟

D.80℃，40分钟

【参考答案】B

【解析】高压蒸汽灭菌是微生物检验中最常用的灭菌方法，标准条件为121℃维持15-30分钟，可灭活包括芽孢在内的所有微生物。其他选项温度或时间不足，无法达到灭菌效果。

2、革兰氏染色中，初染剂和媒染剂的作用顺序是？

A.初染剂先加，媒染剂后加

B.媒染剂先加，初染剂后加

C.两者同时加入

D.无需媒染剂

【参考答案】A

【解析】革兰氏染色流程为初染（结晶紫）、媒染（碘液）、脱色（酒精）、复染（沙黄）。媒染剂在初染后形成复合物，若顺序颠倒会破坏染色效果，导致假阴性。

3、下列哪种微生物需在厌氧环境下培养？

A.大肠杆菌

B金黄色葡萄球菌

C.痢疾杆菌

D.梭菌属

【参考答案】D

【解析】梭菌属（如肉毒梭菌）为严格厌氧菌，需在无氧环境（如厌氧罐）中培养。其他选项均为需氧或兼性厌氧菌，可在普通培养皿中生长。

4、培养皿倒置放置的主要目的是？

A.避免冷凝水倒流污染样本

B.便于观察菌落形态

C.减少光线反射干扰

D.增加氧气供应

【参考答案】A

【解析】倒置培养皿可防止冷凝水滴落至样本表面，影响菌落计数和形态观察。若正放，冷凝水会稀释样本或形成假菌落，选项B为次要目的。

5、检测肠道致病菌时，最常用的增菌培养基是？

A.营养琼脂

B.SS琼脂

C.EC琼脂

D.TCBS琼脂

【参考答案】C

【解析】EC琼脂（伊红美蓝琼脂）用于检测大肠杆菌O157:H7等致病菌，呈碱性环境抑制革兰氏阳性菌，菌落呈黑色中心、绿色边缘的典型特征。SS琼脂（沙氏培养基）用于沙门氏菌检测。

6、以下哪种操作属于生物安全二级实验室的防护要求？

A.直接接触病原微生物样本

B.使用BSL-2级生物安全柜处理气溶胶

C.不佩戴防护手套离心

D.在开放区域进行菌落染色

【参考答案】B

【解析】BSL-2实验室要求所有操作在生物安全柜内进行，气溶胶实验必须使用BSL-2或更高防护。选项A需在BSL-2以上级别，C和D属于直接暴露操作。

7、微生物鉴定中，16SrRNA基因测序的目的是？

A.快速检测抗生素敏感性

B.确定菌属和种的水平分类

C.检测病毒基因组

D.评估环境微生物多样性

【参考答案】B

【解析】16SrRNA基因是细菌分类的黄金标准，测序可准确鉴定到种的水平，而ATP检测用于抗生素敏感性，宏基因组测序用于多样性分析。

8、培养细菌时，若菌落呈粘液状且不透明，可能提示？

A.菌种退化

B.培养基污染

C.微生物处于延滞期

D.检测样本中含抑制剂

【参考答案】A

【解析】菌种退化会导致代谢产物积累，菌落变粘稠。若培养基污染（B）会形成菌落边缘不规则，延滞期（C）表现为菌落生长缓慢但透明，抑制剂（D）会抑制生长而非改变形态。

9、微生物检验中，需重复验证的检测项目是？

A.细菌计数

B.病原菌鉴定

C.灭菌效果检测

D.抗生素敏感性

【参考答案】B

【解析】病原菌鉴定需双重验证（如16SrRNA测序+表型特征），以确保分类准确性。细菌计数（A）可通过标准方法验证灭菌检测（C）需生物指示剂，抗生素敏感性（D）需药敏纸片复核。

10、芽孢的染色方法中，需使用哪种染色剂初染？

A.结晶紫

B.龙胆紫

C.美蓝

D.番红

【参考答案】B

【解析】芽孢染色需先用龙胆紫初染，因其对芽孢壁穿透力强。后续用碘液媒染增强染色效果，形成黑褐色。其他选项：结晶紫和美蓝用于革兰氏染色，番红用于负染色。

11、下列哪种消毒方法可杀灭所有微生物包括芽孢？

A.75%乙醇

B.含氯消毒剂

C.121℃高压蒸汽灭菌

D.紫外线照射

【参考答案】C

【解析】121℃高压蒸汽灭菌30分钟可彻底灭活芽孢及所有微生物。其他选项：75%乙醇仅作用于表面细菌，含氯消毒剂浓度不足时无法灭活芽孢，紫外线仅破坏DNA。

12、检测大肠杆菌O157:H7污染时，需重点观察的生化试验结果是？

A.乳糖发酵

B.硫化氢产生

C.V-P试验阳性

D.吲哚试验阳性

【参考答案】B

【解析】大肠杆菌O157:H7为乳糖非发酵菌，可产生硫化氢使培养基变黑，而V-P试验阳性提示山梨醇发酵（如肠杆菌属），吲哚试验阳性对应霍乱弧菌。

13、制备巧克力琼脂时，添加的主要成分是？

A.乳蛋白

B.巧克力粉

C.血清蛋白

D.肉汤蛋白

【参考答案】B

【解析】巧克力琼脂含加热融化的巧克力粉，提供脂肪酸和维生素促进兼性厌氧菌生长。其他选项：蛋白为鲜血琼脂成分，血清蛋白用于血琼脂，肉汤蛋白多用于