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《高效液相色谱》单项选择及思考题试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、单项选择题（每题2分，共30分。请将正确选项的代表字母填入括号内）

1.在液相色谱中，分离的根本原因是（）。

A.液体流动相的粘度

B.固定相与流动相之间的相互作用力不同

C.柱子的长度

D.检测器的灵敏度

2.下列哪种检测器适用于检测对紫外光吸收很弱或没有吸收的化合物？（）

A.紫外-可见检测器

B.示差折光检测器

C.荧光检测器

D.蒸发光散射检测器

3.在HPLC中，提高柱效的主要途径是（）。

A.增加流动相流速

B.使用更长的色谱柱

C.降低柱温

D.使用更细的填充颗粒

4.等度洗脱中，当流动相中强保留组分的洗脱体积（V0xE20x820x97）等于弱保留组分的洗脱体积（V0xE20x820x97）时，两个组分（）。

A.完全分离

B.部分分离，保留时间差最大

C.重叠在一起

D.分离度最小

5.色谱柱的理论塔板数（N）表示（）。

A.柱子的长度

B.柱子的分离效率

C.柱子的直径

D.柱子中填充物的数量

6.分配系数（K）定义为（）。

A.固定相体积与流动相体积之比

B.流动相浓度与固定相浓度之比

C.在达到平衡时，溶质在固定相中的浓度与在流动相中的浓度之比

D.溶质的分子量

7.选择HPLC固定相时，若要分离极性较大的化合物，通常选择（）。

A.反相键合硅胶（非极性）

B.正相键合硅胶（极性）

C.离子交换柱

D.凝胶过滤柱

8.在梯度洗脱中，如果目标是将一个在流动相A中保留时间很长、在流动相B中保留时间很短的组分分离出来，应采用（）。

A.从流动相A到流动相B的线性梯度

B.从流动相A到流动相B的非线性梯度

C.从流动相B到流动相A的线性梯度

D.等度使用流动相A

9.下列哪个参数是衡量色谱柱分离能力的主要指标？（）

A.容量因子（K）

B.选择因子（α）

C.分离度（Rs）

D.保留时间（t0xE20x820x99）

10.进样量过大可能导致（）。

A.峰形展宽，对称性变差

B.峰位移动，保留时间延长

C.峰高增加，分离度提高

D.检测器饱和

11.在HPLC系统中，用于精确、稳定地输送流动相的部件是（）。

A.进样器

B.检测器

C.色谱柱

D.液体泵

12.对于同一对组分，在其他条件不变的情况下，降低柱温通常会（）。

A.增大保留时间

B.减小保留时间

C.对保留时间无影响

D.改变峰形

13.在使用反相HPLC分离非极性或弱极性化合物时，通常使用（）作为流动相。

A.高极性溶剂（如水）

B.高非极性溶剂（如乙腈、甲基叔丁基醚）

C.强酸性溶剂

D.强碱性溶剂

14.色谱峰展宽的塔板高度（H）越大，表示（）。

A.柱效越高

B.柱效越低

C.分离度越高

D.分离度越低

15.自动进样器的主要优点是（）。

A.可以进行梯度洗脱

B.可以减少人为进样误差

C.可以检测所有组分

D.可以自动进行数据处理

二、思考题（每题10分，共50分。请将答案写在答题纸上）

1.简述高效液相色谱与经典柱色谱在基本原理、仪器设备和分离效能方面的主要区别。

2.解释什么是梯度洗脱？与等度洗脱相比，梯度洗脱有哪些优缺点？适用于哪些情况？

3.说明在反相高效液相色谱中，改变流动相中有机溶剂的比例（即改变洗脱强度）对组分保留时间的影响规律。

4.什么是色谱柱的理论塔板数？它如何反映色谱柱的分离效率？影响理论塔板数的主要因素有哪些？

5.在HPLC分析中，如何选择合适的检测器？紫外-可见检测器和蒸发光散射检测器各适用于哪些类型的化合物的检测？

试卷答案

一、单项选择题

1.B

解析：液相色谱分离的实质是样品组分在固定相和流动相之间分配系数的差异，这种差异导致了组分在色谱柱中的运动速度不同，从而实现分离。流动相粘度、柱长等影响分离时间和效率，但不是根本原因。检测器是检测流出物信号的装置，不决定分离过程。

2.D