建立酶活力测定方法 .pptx

测酶活方法建立;;01;测定对象;1.首先从理论上对两种淀粉酶的性质及催化原理进行了解、对比，找到两种酶催化的最适条件，并通过对两种酶性质的探讨，明确如何在两种酶同时存在的前提下只测定其中一种酶活力的控制方法，以及如何通过实验测定结果反映出酶催化活力的大小。;1.吸收波长;1.吸收波长的确定

在紫外分光光度计上扫描显色液,得吸收光谱，选择最适波长。

2.底物浓度的确定

在最适波长下，固定其他条件，每次只改变底物浓度，隔15s读一次吸光度值，绘制底物浓度与酶反应速率曲线。再绘制Linewear-Burk图。根据数据得回归方程为Y=kx+b,得出底物的酶的Km值。据此,选用最