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植物抗逆基因的功能挖掘与分子干预研究

目录

一、文档概要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

1.1.1植物抗逆性研究的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

1.1.2气候变化对植物生长的挑战．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

1.1.3抗逆基因研究的价值．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

1.2国内外研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

1.2.1植物抗逆基因挖掘进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

1.2.2抗逆基因功能解析方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

1.2.3抗逆基因分子干预技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

1.3研究目标与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

1.3.1主要研究目标．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

1.3.2研究内容框架．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

1.4研究方法与技术路线．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

1.4.1研究方法的选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

1.4.2技术路线的制定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

二、植物抗逆基因的挖掘策略．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

2.1抗逆种质资源的筛选．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43

2.1.1资源收集与评价．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44

2.1.2抗逆性状的表型鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46

2.2抗逆相关基因的分离．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48

2.2.1基因组测序与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50

2.2.2功能基因的候选筛选．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．51

2.2.3目标基因的克隆与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．53

2.3抗逆基因的鉴定方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．55

2.3.1同源基因发掘．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．57

2.3.2差异基因表达分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．58

2.3.3QTL定位与基因精细定位．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．59

三、植物抗逆基因的功能解析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．61

3.1抗逆基因的表达模式分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．61

3.1.1关键基因的表达时序．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．63

3.1.2不同组织器官中的表达分布．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．66

3.1.3激动剂处理下的表达调控机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．69

3.2抗逆基因的生物功能验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．70

3.2.1过表达转基因技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．79

3.2.2RNA干扰技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．80

3.2.3基因编辑技术（CRISPR/Cas9）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．82

3.3抗逆基因的作用机制研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．85

3.3.1信号转导通路分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8