第三章第二节器官发生.pptVIP

①、经过愈伤组织的胚胎发生形成分为三个阶段：诱导愈伤组织形成高浓度生长素诱导愈伤组织胚性化需要降低生长素浓度体细胞胚形成进一步降低第29页，共61页，星期日，2025年，2月5日诱导愈伤组织形成愈伤组织胚性化球性胚形成子叶胚期（引自Lin等，2000）第30页，共61页，星期日，2025年，2月5日②、经悬浮培养的体细胞胚发生代表：胡萝卜形成过程悬浮系胚性细胞团（两种细胞，胚性细胞表现为体积小、成簇存在、胞质稠密）胚胎发生培养基外周细胞不均等分裂靠近细胞团的大细胞形成胚柄类似物，远离细胞团的小细胞形成原胚。第31页，共61页，星期日，2025年，2月5日愈伤组织胚性愈伤组织悬浮培养的胚性细胞团球性胚形成成熟子叶胚（引自Choi等，1997）第32页，共61页，星期日，2025年，2月5日例：胡萝卜体细胞胚发生过程第33页，共61页，星期日，2025年，2月5日第34页，共61页，星期日，2025年，2月5日（3）、体细胞胚的特点与器官发生形成个体的途径相比，体细胞胚发育再生植株有三个明显的特点：体细胞胚具有双极性（doulblepolarity）；生理隔离（physiologicalisolation）现象：体细胞胚形成后与母体的维管束系统连系较少，后期脱落。起源于单细胞，遗传稳定。嵌合体第35页，共61页，星期日，2025年，2月5日器官发生途径与体细胞胚途径的比较第36页，共61页，星期日，2025年，2月5日（3）、体细胞胚的特点与合子胚比较：合子胚体细胞胚胚柄具有明显的胚柄一般没有真正的胚柄子叶规范（可以作为分类的依据）常不规范体积大小贮藏物质干物质多少水分少多（不能有明显的脱水干燥过程）休眠有可直接形成植株第37页，共61页，星期日，2025年，2月5日（3）、体细胞胚的特点数量多结构完整稳定性好第38页，共61页，星期日，2025年，2月5日3.影响体细胞胚发生的因素激素的调控作用培养基及培养条件的影响基因型的影响第39页，共61页，星期日，2025年，2月5日3.影响体细胞胚发生的因素（1）、激素的调控作用生长素对体细胞胚的形成有决定性的作用。Ribnicky等在胡萝卜上胚轴培养中证明，体细胞胚形成初期细胞内具有较高浓度的游离态生长素。水稻胚性细胞的诱导也证明，高浓度的2,4-D诱导细胞内IAA含量升高，当加入外源IAA或阻止细胞内IAA渗出而提高细胞内IAA含量时，均可促进胚性愈伤组织形成。第40页，共61页，星期日，2025年，2月5日3.影响体细胞胚发生的因素（1）、激素的调控作用生长素不仅影响体细胞胚的早期发生，同时也影响体细胞胚的后期发育。生长素对体细胞胚后期发育的影响是通过极性运输实现的。Liu等（1993）利用拟南芥幼胚培养体系，揭示了生长素极性运输由球形胚期的轴向对称转向心形胚期的两侧对称的过程。如果这一过程受阻，则导致子叶异常发育成筒状子叶，而不是正常的2个子叶。第41页，共61页，星期日，2025年，2月5日3.影响体细胞胚发生的因素（1）、激素的调控作用2,4-D是应用最为广泛的生长素。2,4-D的应用有着规律性的变化，首先是在较高浓度下诱导胚性细胞的形成，然后在降低2,4-D的浓度下产生早期胚胎，一般在球形胚形成后，除去生长素有利于体细胞胚的继续发育。外源生长素的对体细胞胚产生和发育的调控是通过调节内源激素的合成、代谢、极性运输和平衡而起作用的。第42页，共61页，星期日，2025年，2月5日