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检验科常见检测方法培训

目录

ENT

目录

CONT

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01

基础检测方法概述

02

免疫学检测技术

03

微生物学检验方法

04

分子诊断技术

05

质量管理与结果解读

06

新技术与标准化操作

基础检测方法概述

01

分光光度法

基于物质对特定波长光的吸收特性进行定量分析，广泛应用于酶活性、代谢产物（如血糖、尿酸）等项目的检测，需严格控制反应温度与时间以确保准确性。

电化学分析法

通过测量样本中离子的电位或电流变化来测定电解质（如钾、钠、氯离子），电极的定期校准和样本抗凝处理是保证结果可靠的关键步骤。

免疫比浊法

利用抗原抗体反应形成的浊度变化定量特定蛋白（如C反应蛋白、免疫球蛋白），需注意钩状效应（高浓度样本导致的假性低值）的排除。

生化检测技术原理

采用电阻抗或流式细胞术原理分析红细胞、白细胞及血小板参数，需严格混匀样本并避免冷凝集素干扰，同时复核异常散点图或报警信息。

血液学常规检测流程

全血细胞计数（CBC）

对异常结果（如未成熟粒细胞、异型淋巴细胞）进行人工复检，要求熟练掌握瑞氏-吉姆萨染色技术及细胞形态学分类标准。

血涂片制备与镜检

通过魏氏法观察红细胞在抗凝全血中的沉降速率，需控制环境温度并确保样本在采集后规定时间内完成检测以避免假性升高。

血沉（ESR）测定

体液样本处理规范

立即送检以避免细胞溶解，分装样本分别用于生化（葡萄糖、蛋白）、微生物（革兰染色、培养）及细胞学检查，离心后镜检需采用高倍镜计数有核细胞。

脑脊液（CSF）检测

区分漏出液与渗出液需结合比重、LDH、蛋白等指标，细胞块制备技术可提高恶性肿瘤细胞的检出率，结核性积液需同步进行抗酸染色与PCR检测。

浆膜腔积液分析

干化学试纸条需避光保存并定期质控，镜检时标准化离心条件（如400g×5分钟），重点关注管型、结晶及异常上皮细胞的形态学特征。

尿液干化学与沉渣镜检

免疫学检测技术

02

酶联免疫吸附试验（ELISA）

01

02

03

基本原理与类型

通过酶标记抗体或抗原与待测物特异性结合，利用底物显色反应定量检测目标物质，包括直接法、间接法、夹心法和竞争法四种主要类型，适用于蛋白质、激素、抗体等大分子检测。

操作流程与质量控制

需严格规范包被、封闭、加样、孵育、洗涤和显色步骤，同时设置空白对照、阴性对照和标准曲线，确保检测结果的准确性和重复性。

临床应用范围

广泛用于传染病（如HIV、乙肝）、自身免疫疾病（如ANA检测）、肿瘤标志物（如CEA、AFP）及过敏原筛查等领域。

技术原理与优势

需配套全自动化学发光分析仪（如罗氏Cobas、雅培Architect），并严格匹配校准品、质控品和反应底物，避免交叉污染和信号衰减。

仪器与试剂系统

典型应用场景

适用于甲状腺功能（TSH、FT4）、心肌标志物（肌钙蛋白、BNP）、激素（HCG、胰岛素）等微量物质的精准检测。

基于化学发光物质（如鲁米诺、吖啶酯）标记抗体/抗原，通过发光信号强度定量分析，具有灵敏度高（可达pg/mL）、线性范围宽、自动化程度高的特点。

化学发光免疫分析

免疫荧光法应用场景

直接与间接免疫荧光区别

直接法采用荧光标记的一抗直接检测抗原，操作简便但灵敏度较低；间接法通过二抗放大信号，适用于低丰度抗原检测，如自身抗体（抗dsDNA抗体）鉴定。

组织与细胞检测

常用于冰冻切片或培养细胞的抗原定位（如病毒抗原、肿瘤标志物），需配备荧光显微镜并优化抗体浓度和封闭条件以减少非特异性染色。

传染病快速诊断

在呼吸道合胞病毒（RSV）、登革热等病原体检测中，免疫荧光法可结合特异性单克隆抗体实现快速（1-2小时）筛查，但需注意样本保存和荧光淬灭问题。

微生物学检验方法

03

细菌培养与鉴定流程

标本采集与处理

严格遵循无菌操作规范，根据感染部位选择合适采样方式（如血液、尿液、痰液等），标本需及时送检并预处理（如离心、均质化）以提高检出率。

01

菌落观察与生化鉴定

通过菌落形态（大小、颜色、溶血性）、革兰染色结果及生化反应（如氧化酶试验、糖发酵试验）初步鉴定菌种，必要时辅以自动化仪器（如VITEK、MALDI-TOFMS）精准鉴定。

培养基选择与接种

根据疑似病原体选择特定培养基（如血琼脂、麦康凯琼脂），分区划线接种以分离单菌落，需注明培养条件（需氧/厌氧、温度、时间）。

02

结合临床信息出具鉴定报告，定期使用标准菌株（如ATCC系列）进行培养流程质控，确保结果准确性。

04

03

结果报告与质控

药敏试验操作标准

纸片扩散法（K-B法）

将含特定抗生素的纸片贴于接种菌液的琼脂平板，测量抑菌圈直径，参照CLSI标准判读敏感、中介或耐药，需严格控制接种菌液浓度（0.5麦氏单位）和培养时间（16-18小时）。

微量肉汤稀释法

使用96孔板配制梯度浓度抗生素，加入菌液孵育