邻二氮菲分光光度法测定微量铁的含量无机及分析化学93课件.pptxVIP

邻二氮菲分光光度法测定微量铁的含量无机及分析化学主讲老师：刘桂林

2目录3试剂与仪器2实验原理1实验目的4实验步骤思考与讨论5

NO.1实验目的

实验目的掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长。学会制作标准曲线的方法。通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁的含量，掌握可见分光光度计的正确使用方法，并了解此仪器的主要构造。

NO.2实验原理

邻二氮菲（1,10-二氮杂菲），也称邻菲罗啉是测定微量铁的一个很好的显色剂。在pH2-9范围内（一般控制在5-6间）Fe2+与试剂生成稳定的橙红色配合物Fe（Phen）32+，其lgK=21.3。实验原理在510nm下，其摩尔吸光系数为1.1104L/(moL.cm）。Fe3+与邻二氮菲作用生成兰色配合物，稳定性较差，因此在实际应用中常加入还原剂盐酸羟胺使Fe3+还原为Fe2+：2Fe3++2NH2OHHCl=2Fe2++N2+4H++2H2O+2Cl-

NO.3仪器与试剂

仪器50mL容量瓶8个(2人/组)，100mL1个500mL1个刻度吸管：10mL、5mL、1mL各1支可见分光光度液管：2mL1支，10mL1支

试剂(1)铁标准储备溶液100μg/mL：500mL。(2)6moL/LHCl溶液：60mL。(3)盐酸羟胺10%(新鲜配制)：300mL。(4)邻二氮菲溶液0.15%(新鲜配制)：500mL。(5)HAc-NaAc缓冲溶液(pH=5)1000mL。(6)未知水样配制（教师配制）。

NO.4实验步骤

绘制吸收曲线铁标准使用液10μg/mL：用移液管移取上述铁标准储备液10.00mL，置于100mL容量瓶中，加入6moL/LHCl2.0mL和少量水，然后加水稀释至刻度，摇匀。用吸量管吸取铁标准溶液(10ug/mL)0.00ml和2.00mL分别放入50mL容量瓶（比色管）中，加入1mL10%盐酸羟胺溶液、2mL0.15%邻二氮菲溶液和5mLHAc-NaAc缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀，放置5分钟，用1cm比色皿，以0.00ml样品为参比液，于可见分光光度计中，在420-600nm波长范围内分别测定其吸光度A值。然后以波长为横坐标，所测A值为纵坐标，绘制吸收曲线，并找出最大吸收峰的波长。

标准曲线的绘制用吸量管分别移取铁标准溶液(10ug/mL)0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL依次放入7只50mL容量瓶（比色管）中；分别加入10%盐酸羟胺溶液1mL，稍摇动，再加入0.15%邻二氮菲溶液2.0mL及5mLHAc-NaAc缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀，放置5分钟；用1cm比色皿，以0.00ml样品为参比液，选择最大测定波长为测定波长，依次测A值。以铁的质量浓度为横坐标，A值为纵坐标，绘制标准曲线。

水样分析分别加入5.00mL(或10.00mL，铁含量以在标准曲线范围内为宜)未知试样溶液；按实验步骤(2)的方法显色后，在最大测定波长处，用1cm比色皿，以0.00ml样品为参比液，平行测A值。求其平均值，在标准曲线上查出铁的含量，计算水样中铁的质量浓度。

NO.5思考与讨论

思考与讨论邻二氮菲分光光度法测定微量铁时为什么要加入盐酸羟胺溶液？吸收曲线与标准曲线有何区别？在实际应用中有何意义？

感谢观看无机及分析化学主讲老师：刘桂林