发酵过程控制 (2).pptVIP

发酵过程控制第1页，共34页，星期日，2025年，2月5日一、发酵过程pH变化的原因1、基质代谢（1）糖代谢特别是快速利用的糖，分解成小分子酸、醇，使pH下降。糖缺乏，pH上升，是补料的标志之一（2）氮代谢当氨基酸中的-NH2被利用后pH会下降；尿素被分解成NH3，pH上升，NH3利用后pH下降，当碳源不足时氮源当碳源利用pH上升。（3）生理酸碱性物质利用后pH会上升或下降发酵过程控制发酵过程的pH控制第2页，共34页，星期日，2025年，2月5日2、产物形成某些产物本身呈酸性或碱性，使发酵液pH变化。如有机酸类产生使pH下降，红霉素、洁霉素、螺旋霉素等抗生素呈碱性，使pH上升。3、菌体自溶，pH上升，发酵后期，pH上升。发酵过程控制发酵过程的pH控制第3页，共34页，星期日，2025年，2月5日二、pH对发酵的影响例pH对林可霉素发酵的影响林可霉素发酵开始，葡萄糖转化为有机酸类中间产物，发酵液pH下降，待有机酸被生产菌利用，pH上升。若不及时补糖、(NH4)2SO4或酸，发酵液pH可迅速升到8.0以上，阻碍或抑制某些酶系，使林可霉素增长缓慢，甚至停止。对照罐发酵66小时pH达7.93，以后维持在8.0以上至115小时，菌丝浓度降低，NH2-N升高，发酵不再继续。发酵15小时左右，pH值可以从消后的6.5左右下降到5.3，调节这一段的pH值至7.0左右，以后自控pH，可提高发酵单位。1、实例发酵过程控制发酵过程的pH控制第4页，共34页，星期日，2025年，2月5日pH7.0t不调pH调pH效价pH发酵过程控制发酵过程的pH控制第5页，共34页，星期日，2025年，2月5日例：培养基初始pH值对漆酶分泌的影响pH在4～7范围内产酶最高发酵过程控制发酵过程的pH控制第6页，共34页，星期日，2025年，2月5日2、pH对发酵的影响（1）pH影响酶的活性。当pH值抑制菌体某些酶的活性时使菌的新陈代谢受阻（2）pH值影响微生物细胞膜所带电荷的改变，从而改变细胞膜的透性，影响微生物对营养物质的吸收及代谢物的排泄，因此影响新陈代谢的进行（3）pH值影响培养基某些成分和中间代谢物的解离，从而影响微生物对这些物质的利用发酵过程控制发酵过程的pH控制第7页，共34页，星期日，2025年，2月5日（4）pH影响代谢方向pH不同，往往引起菌体代谢过程不同，使代谢产物的质量和比例发生改变。例如黑曲霉在pH2~3时发酵产生柠檬酸，在pH近中性时，则产生草酸。谷氨酸发酵，在中性和微碱性条件下积累谷氨酸，在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺发酵过程控制发酵过程的pH控制第8页，共34页，星期日，2025年，2月5日3、pH在微生物培养的不同阶段有不同的影响生长合成pH对菌体生长影响比产物合成影响小例青霉素：菌体生长最适pH3.5~6.0,产物合成最适pH7.2~7.4四环素：菌体生长最适pH6.0~6.8，产物合成最适pH5.8~6.0XpH四环素发酵过程控制发酵过程的pH控制第9页，共34页，星期日，2025年，2月5日4、最佳pH的确定配制不同初始pH的培养基，摇瓶考察发酵情况pH对产海藻酸裂解酶的影响发酵过程控制发酵过程的pH控制第10页，共34页，星期日，2025年，2月5日pH对海藻糖水解酶产生的影响pH——菌浓pH——酶活发酵过程控制发酵过程的pH控制第11页，共34页，星期日，2025年，2月5日pH对谷氨酰胺转氨酶活力的影响发酵过程控制发酵过程的pH控制第12页，共34页，星期日，2025年，2月5日热凝胶产生不同阶段pH的考察biomass发酵过程控制发酵过程的pH控制第13页，共34页，星期日，2025年，2月5日从图中可见，热凝胶发酵菌体生长和热凝胶合成是非偶联的，整个发酵过程可以分成两个阶段：前10h是菌体生长期，之后热凝胶开始合成，至发酵结束是热凝胶合成期。在菌体生长期，DO直线下降，培养液中的pH也迅速下降。10h左右，菌体质量浓度达到最大值，DO和pH降至最低点（5.4～5.6），菌体生长结束。此后进入热凝胶合成期。试验两阶段的最适pH，见表发酵过程控制发酵过程的pH控制第14页，共34页，星期日，2025年，2月5日发酵过程控制发酵过程的pH控制第15页，共34页，星期日，2025年，2月5日稳定期随着pH降低，糖耗速率增加，生物量增加，但产物合成速率在pH5.6时达到最高。说明当pH小于5.6以后微生物消耗的糖并非用于合成热凝胶，而是合成菌体。发酵