审答辩临床医学检验临床微生物技术历年题库及答案解析.docxVIP

审答辩临床医学检验临床微生物技术历年题库及答案解析

临床微生物技术作为医学检验的核心分支，其考核重点围绕病原体形态识别、检验技术原理、实验室质量控制及临床感染诊断等方向展开。以下通过典型历年考题及深度解析，系统梳理核心知识点与易错要点。

一、基础理论与检验技术选择题解析

1.革兰染色过程中，95%乙醇的作用是（）

A.初染剂

B.媒染剂

C.脱色剂

D.复染剂

答案：C

解析：革兰染色步骤为结晶紫初染（A错误）→碘液媒染（B错误，碘液通过与结晶紫结合形成复合物增强染色）→95%乙醇脱色（C正确，革兰阳性菌细胞壁肽聚糖层厚，乙醇处理后脱水使孔隙缩小，结晶紫-碘复合物滞留；革兰阴性菌肽聚糖层薄，脂类含量高，乙醇溶解脂类后孔隙增大，复合物被洗脱）→沙黄复染（D错误，复染后革兰阴性菌呈红色）。本题易错点在于混淆媒染剂与脱色剂的作用，需结合细胞壁结构差异理解。

2.分离培养流感嗜血杆菌时，培养基中需添加的生长因子是（）

A.X因子（血红素）和V因子（NAD）

B.X因子（NAD）和V因子（血红素）

C.维生素B12和叶酸

D.半胱氨酸和葡萄糖

答案：A

解析：流感嗜血杆菌为苛养菌，需X因子（血红素，提供细胞色素酶、过氧化物酶的辅基）和V因子（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，NAD，参与递氢）才能生长。巧克力培养基因加热破坏红细胞释放X、V因子，是其常用培养基。选项B颠倒X、V因子定义；C为部分肠道菌所需；D为支原体培养基添加成分。本题需牢记苛养菌的特殊营养需求。

3.以下哪种方法可用于区分肠球菌与链球菌（）

A.触酶试验

B.胆汁七叶苷试验

C.氧化酶试验

D.血浆凝固酶试验

答案：B

解析：肠球菌与链球菌均为革兰阳性球菌，触酶试验均阴性（A错误）。肠球菌能在40%胆汁中生长并分解七叶苷（产黑色沉淀），而链球菌（除D群链球菌外）不能（B正确）。氧化酶试验用于区分革兰阴性菌（C错误）；血浆凝固酶试验是葡萄球菌属的鉴定指标（D错误）。本题核心是掌握链球菌属与肠球菌属的鉴别试验，胆汁七叶苷和6.5%NaCl生长试验为关键。

二、病原体鉴定与药敏分析案例题解析

案例1：患者男性，58岁，因“发热、咳嗽1周，加重伴胸痛2天”入院。体温39.2℃，WBC18.6×10?/L，中性粒细胞89%。痰涂片革兰染色见大量革兰阳性双球菌，呈矛头状，成对排列，周围有透明荚膜。痰培养显示血平板上形成α溶血、圆形、光滑、湿润的小菌落，菌落周围有草绿色溶血环。

问题1：最可能的病原体是？需补充哪些鉴定试验？

问题2：该病原体的主要致病物质及耐药机制是什么？

问题3：若药敏试验显示对青霉素中介，临床应如何调整治疗？

答案与解析

问题1：根据形态（革兰阳性矛头状双球菌、荚膜）、培养特征（血平板α溶血），初步考虑肺炎链球菌。需补充Optochin（乙基氢化羟基奎宁）敏感试验（肺炎链球菌对Optochin敏感，抑菌环＞14mm；草绿色链球菌耐药）、胆汁溶菌试验（肺炎链球菌可被胆汁溶解，菌落消失）。

问题2：主要致病物质包括：①荚膜（抗吞噬，是主要毒力因子）；②肺炎链球菌溶血素（破坏宿主细胞）；③神经氨酸酶（促进黏附）。耐药机制以青霉素结合蛋白（PBPs）基因突变为主，导致PBPs与β-内酰胺类抗生素亲和力下降，而非产生β-内酰胺酶（与金黄色葡萄球菌不同）。

问题3：青霉素中介（MIC0.12-1.0μg/mL）时，需根据感染部位调整：若为非脑膜炎感染（如肺炎），可通过提高青霉素剂量（大剂量静脉给药）达到有效血药浓度；若为脑膜炎（需穿透血脑屏障），则需换用头孢曲松、头孢噻肟或呼吸喹诺酮类（如左氧氟沙星），必要时联合万古霉素。

案例2：某ICU患者留置中心静脉导管7天，出现高热（39.8℃）、寒战，血培养（需氧瓶）24小时报阳，涂片见革兰阳性球菌，呈葡萄串状排列。

问题1：可能的病原体有哪些？需进一步做哪些试验？

问题2：若该菌对苯唑西林耐药，需报告哪些关键信息？

问题3：针对该菌引起的导管相关血流感染（CRBSI），实验室应如何协助临床判断是否为感染而非污染？

答案与解析

问题1：革兰阳性葡萄串状球菌，首先考虑葡萄球菌属，常见为金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌（如表皮葡萄球菌）。需做触酶试验（葡萄球菌属阳性，链球菌属阴性）、血浆凝固酶试验（金葡菌阳性，凝阴葡菌阴性）、耐热核酸酶试验（金葡菌阳性，用于区分凝固酶阴性葡萄球菌）。

问题2：苯唑西林耐药提示为耐甲氧西林葡萄球菌（MRS），需①对所有β-内酰胺类抗生素（青霉素类、头孢类、碳青霉烯类）耐药；②需检测万古霉素MIC（警惕VRSA/VRE）；③建议临床使用糖肽类（