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一种新型PCR扩增反应体系的筛选与优化

摘要

一种新型的PCR（聚合酶链式反应）扩增的方法不仅有利于提高扩增的一次成功率，还可以方便下游的开展，提高工作的效率与成功率。对于GC含量较高的DNA序列在基因组中广泛存在，它们特别容易形成二级结构干扰PCR扩增，难以得到所需目的基因。为解决此问题,采取了各种措施如增加变性及退火温度;用NaOH进行DNA模板变性;加入DMSO、甘油、甲酰胺等溶剂破坏碱基配对;加入dGTP类似物以降低熔解温度Tm等。但上述办法只对部分GC丰富DNA的扩增有效,许多情况下完全无效。近年研究通过使用不同的添加剂，发现相比于二