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病理科肿瘤标本处理指南
CATALOGUE
目录
01
标本接收与登记
02
固定与保存方法
03
切片制备技术
04
实验室分析流程
05
质量控制体系
06
安全与合规管理
01
标本接收与登记
接收标本时需由两名工作人员共同核对患者信息、标本类型及数量,确保与申请单完全一致,避免人为疏漏导致的差错。
双人核对机制
接收流程标准化
冷链运输验证
异常标本处理
对于需低温保存的肿瘤标本,需检查运输过程中的温度记录,确认未发生温度波动或冷链断裂,以保证标本生物活性不受影响。
对破损、渗漏或标识不清的标本,需立即隔离并启动追溯流程,联系临床科室重新采集,同时记录异常情况备查。
采用条码或RFID技术将患者ID、标本类型、取材部位等关键信息录入病理信息系统,实现全流程可追溯,减少手工录入错误风险。
电子化管理系统
系统设置必填字段(如病理号、临床诊断、送检医生等),未完整填写时自动拦截提交,确保数据录入无遗漏。
必填字段强制校验
录入信息需经初级审核(技术员)和终审(病理医师)双重确认,尤其关注特殊标本(如术中冰冻)的紧急标识和优先级标注。
多级审核制度
信息录入完整性
标本标识统一性
唯一标识规则
采用“病理号+标本序号”的编码体系,确保每个标本容器、申请单及信息系统数据一一对应,避免混淆或重复编号。
分装标本关联性管理
对需分装的多部位标本(如肿瘤组织与切缘),需在主容器标注分装关系,并在信息系统中建立逻辑关联,确保后续检测环节的连贯性。
防水防脱落标签
使用耐冷冻、抗有机溶剂的专用标签材料,打印内容需包含患者姓名缩写、病理号及标本类型,并附加二维码便于扫描识别。
02
固定与保存方法
固定液选择基准
中性缓冲福尔马林
作为标准固定液,其pH值稳定在7.2-7.4,能有效保存组织形态并减少人工假象,适用于大多数肿瘤标本的初步固定。
乙醇类固定液
适用于特殊免疫组化检测需求,可保留部分抗原活性,但需注意其对组织收缩的影响,需根据检测项目调整浓度与配方。
Bouin氏液
针对富含结缔组织或钙化的肿瘤标本(如骨肉瘤),其苦味酸成分能软化组织并增强染色对比度,但需后续充分冲洗以避免干扰后续检测。
常规标本固定时长
对于直径超过3cm的肿瘤标本,需先行剖开或切片后固定,必要时补充灌注固定技术,总时长可延长至48小时并定期更换固定液。
大体积标本处理
特殊样本例外
淋巴造血系统肿瘤等易碎组织需缩短固定时间至4-8小时,并采用低浓度福尔马林以减少细胞形态破坏。
实体肿瘤组织块厚度不超过5mm时,需浸泡6-24小时以确保充分渗透,过短会导致中心区域固定不足,过长可能引起组织过度硬化。
固定时间控制规范
保存环境要求
温度与湿度调控
固定后标本应存放于4℃恒温环境中,相对湿度维持在60%-70%以防止组织脱水或霉变,长期保存需密封防蒸发。
避光与通风条件
福尔马林固定液需避光保存以减少甲醛降解,同时实验室需配备强制通风系统,确保甲醛浓度低于安全阈值。
容器材质标准
使用惰性塑料或玻璃容器存放标本,避免金属容器导致化学反应,液体保存时液面需完全覆盖组织并定期检查补充。
03
切片制备技术
梯度酒精脱水
采用从低浓度到高浓度的酒精梯度脱水,逐步置换组织内水分,避免组织收缩或变形,确保后续包埋和切片质量。
透明剂处理
使用二甲苯等透明剂置换酒精,使组织透明化并增强石蜡渗透性,为包埋步骤奠定基础。
石蜡浸透与包埋
将脱水透明后的组织置于熔融石蜡中充分浸透,随后用包埋模具固定,冷却后形成均匀坚实的石蜡块,便于切片操作。
温度与时间控制
严格控制脱水、透明和浸蜡各环节的温度与时间参数,避免组织过硬或过脆影响切片效果。
脱水与包埋步骤
切片厚度标准
大多数肿瘤组织切片厚度应控制在4-6微米,过厚可能导致细胞重叠影响观察,过薄则易造成组织撕裂。
常规切片厚度
切片需保持整体平整无褶皱,刀片锋利度、切片机角度及石蜡块温度均需精确调控以确保切片质量。
切片平整度要求
针对某些特殊染色或分子检测(如荧光原位杂交),可调整切片厚度至2-3微米以提高分辨率和信号强度。
特殊需求调整
01
03
02
对微小病灶或需多层面分析的标本,采用连续切片并编号保存,便于后续对比和补充检测。
连续切片技术
04
染色程序优化
苏木精-伊红(HE)染色标准化
优化染色液浓度、pH值及分化时间,确保细胞核与胞质对比清晰,避免过染或褪色现象。
01
特殊染色选择
根据肿瘤类型选择针对性染色(如Masson三色染色检测纤维化,PAS染色显示黏液成分),需预先验证染色条件。
02
自动化染色应用
采用全自动染色机替代手工操作,减少人为误差,提高染色一致性和批次间可比性。
03
染色后封片保护
使用中性树胶封片并避免气泡产生,延长切片保存时间,同时确保显微镜下观察无光学畸变。
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