羊痘病毒A33重组质粒的构建及在293T细胞中的表达.docx

羊痘病毒A33重组质粒的构建及在293T细胞中的表达

摘要:A33是羊痘病毒囊膜表面的结构蛋白，含有主要的抗原表位，是羊痘病毒中特异性高、免疫原性强的结构蛋白。PNLF1-N载体在基于寨卡病毒N2BS荧光素酶免疫吸附法检测寨卡病毒抗体一文的实验中使用过，该载体中含有荧光素酶基因，通过荧光素酶底物反应产生的荧光信号可以对羊痘病毒进行检测。设计引物，选取实验室之前得到的羊痘病毒基因组，提取羊痘病毒A33的DNA。然后利用PCR扩增技术得到目标片段。将PCR扩增产物与pNLF1-N载体分别都用EcoR1、Xba1酶进行剪切并连接。将得到的重组质粒用jetPrimer转染试剂转染至293T细胞中使