第3章吸附层析.ppt

记录仪第30页，共77页，星期日，2025年，2月5日第31页，共77页，星期日，2025年，2月5日AKTApurifier10第32页，共77页，星期日，2025年，2月5日1.色谱柱2.吸附剂及用量3.装柱4.上样和洗脱5.收集和检测6.吸附剂的再生色谱操作第33页，共77页，星期日，2025年，2月5日图理想的装柱示意图第34页，共77页，星期日，2025年，2月5日4.上样和洗脱图加样操作示意图第35页，共77页，星期日，2025年，2月5日5.收集和检测6.吸附剂的再生第36页，共77页，星期日，2025年，2月5日色谱分类按两相所处状态分：流动相液体气体固定相液体液液色谱气液色谱固体液固色谱气固色谱第37页，共77页，星期日，2025年，2月5日吸附固体吸附能力不同分配液体分配系数不同离子交换离子交换剂亲和性不同凝胶多孔凝胶，通过速度不同亲和固定相只能与一种组分结合，——分开其它无亲和力的组分按色谱原理分：固定相各组分对固定相第38页，共77页，星期日，2025年，2月5日柱固定相装于柱内纸固定相是液体，吸附在滤纸上，将样品点在纸上，用流动相展开薄层将有适当粘度的固定相涂在薄板上薄膜与纸层析相似，纸用其它高分子有机吸附剂代替按操作形式分：第39页，共77页，星期日，2025年，2月5日●按色谱动力学过程分类迎头法、顶替法和洗脱法●按应用目的分类分析型色谱和制备型色谱●按色谱过程的特殊物理化学原理或特殊的操作方式分类，如：*化学键合相色谱*裂解色谱*二维色谱*手性色谱其他分类方式第40页，共77页，星期日，2025年，2月5日色谱图与色谱参数色谱图（色谱流出曲线）是柱后流出物通过检测器产生的响应信号对时间或流动相流出体积的关系曲线图。它反映分离的各组分从色谱柱洗出浓度随时间的变化，从一个侧面记录组分在柱内运行的情况。分离过程研究或分离制备，关注被分离物在柱上的位置；“谱带，Band”分析测定关注分离信号；“色谱峰，Peak”第41页，共77页，星期日，2025年，2月5日色谱峰的个数、位置、大小和形状？第42页，共77页，星期日，2025年，2月5日l??色谱峰个数：与样品组分数有关l??色谱峰大小：“定量”峰高和峰面积l?色谱峰形状：“高斯峰”，峰宽“柱效”：标准偏差?、半峰高宽度、峰（底）宽W0.607h=2?Wh/2=2.354?W=4?l?色谱峰位置：“定性”保留时间或保留体积；死时间或死体积；计算容量因子等参数第43页，共77页，星期日，2025年，2月5日保留值定性的依据：两个相同的物质在相同的色谱条件下应该有相同的保留值。但相反的结论不一定成立，即在相同的色谱条件下，具有相同的保留值的两个物质不一定是同一物质。这就使得使用保留值定性时必须十分慎重。实验方法：在相同的色谱条件(色谱柱、流动相组成、柱温、流速等不变)下分别测定被测化合物与标准样的保留值，如果保留值相等,就可初步认为被测化合物为标准样化合物。第44页，共77页，星期日，2025年，2月5日利用保留值定性方法简便,除了要求提供标准化合物（对照品）、控制相同色谱条件外，更重要的是要对样品组分要有足够的了解,同时相关组分的分辨率要足够高。由于某些组分的保留值可能相同或非常接近,可采用不同(特别是性质相差较大)的色谱体系,如多次改变流动相组成后,若被测化合物的保留值与标准物的保留值均保持一致,则能进一步证明被测化合物与标准物一致。其他色谱定性方法。如何提高保留值定性方法的可靠性？第45页，共77页，星期日，2025年，2月5日色谱峰形状与峰宽在等温线性的色谱条件下，色谱峰一般呈对称的正态分布（高斯，Gaussian）曲线。色谱流出曲线方程为：3a）为什么大多数色谱图不是对称的高斯峰？3b）增大进样量，色谱峰增大，半高峰宽会变大吗？为什么？3c）峰宽与柱效的关系第46页，共77页，星期日，2025年，2月5日色谱峰的区域宽度与组分的保留时间一般呈线性关系，即峰半高宽度或峰低宽度随组分保留时间呈线性增加。第47页，共77页，星期日，2025年，2月5日影响色谱峰大小的因素a）峰高可以定量吗？为什么？b)对于同一样品中的A和B两个组分，能否直