第十一章 细菌.pptVIP

培养细菌的价值细菌的分类试验台操作操作规则获得细菌的途径细菌培养和维护获得分离的克隆细菌计数贮藏污染第30页，共47页，星期日，2025年，2月5日细菌计数使用PetroffHausser计数计活菌平板计数第31页，共47页，星期日，2025年，2月5日使用PetroffHausser计数计用1ml或2ml的移液管无菌移取0.5ml的菌液至微量离心管中，如果菌液量较少，就减少移取的体积。取出计数计，用水和70%的乙醇将其清洗干净，用吸水纸吸干，将盖玻片放上，保证计数室处在盖玻片的中央。将50μl菌液加入计数室。取样前将菌体摇匀，吸出50μl，不要直接打下。缓慢按下移液器的按钮，使液体滴出，但不要滴下，让这一滴液体留在嘴尖，把这一滴液体接触盖玻片。第32页，共47页，星期日，2025年，2月5日的一边，由于毛细现象液体会被吸入。注意不要使液体溢出计数室，如果液体溢出到沟槽内，那么把板吸干重新来过。静置5min。把计数板放在载物台上，用10×物镜找到计数室后，换到40×物镜。大体数一下以决定是否需要稀释，在25个小方块内应有100-500个菌体。如果太多，计数会不准确。稀释5或10倍后，半数时会省下很多时间。第33页，共47页，星期日，2025年，2月5日**第十一章细菌第1页，共47页，星期日，2025年，2月5日细菌的分类试验台操作操作规则获得细菌的途径细菌培养和维护获得分离的克隆细菌计数贮藏污染第2页，共47页，星期日，2025年，2月5日一细菌的分类

1级（不致病）大肠杆菌枯草杆菌2级（低致病）沙门氏菌志贺氏菌BL1BL2级操作3级（高治病）结核分支杆菌牛分支杆菌BL3级操作4级（对个体和社会造成巨大危害）部分节肢动物传染病毒、沙粒病毒和线状病毒BL4级操作第3页，共47页，星期日，2025年，2月5日细菌的分类试验台操作操作规则获得细菌的途径细菌培养和维护获得分离的克隆细菌计数贮藏污染第4页，共47页，星期日，2025年，2月5日二试验台操作筛选突变体培养有机体测定细菌的浓度离心培养物转化抽提质粒培养使用过的废物分：锋利的、液体废物、固体废物、放射性废物等第5页，共47页，星期日，2025年，2月5日细菌的分类试验台操作操作规则获得细菌的途径细菌培养和维护获得分离的克隆细菌计数贮藏污染第6页，共47页，星期日，2025年，2月5日三操作规则遵守最通常的实验室安全守则每天最少清洗一次试验台丢弃可能传染疾病的废物前要清除污染接触可传染的物质后，在离开实验室前都要洗手实验中尽量避免产生气溶胶不要积累培养皿和试管第7页，共47页，星期日，2025年，2月5日废物处理液体废物：加入次氯酸钠至终浓度10%，放置30分钟后再倒入下水道，大量水冲洗。固体废物：当作有生物危害的物品处理，高温高压灭菌后丢弃，这是一个实验室或是系的责任而且必须注明。第8页，共47页，星期日，2025年，2月5日细菌的分类试验台操作操作规则获得细菌的途径细菌培养和维护获得分离的克隆细菌计数贮藏污染第9页，共47页，星期日，2025年，2月5日四获得细菌的途径实验室成员其他研究人员美国模式培养物保藏所（ATCC）其他的收集和服务组织(疾病控制和防治中心等)每得到新菌株都要确认它的确是你所需要的那种，不要根据包装或价格来认定第10页，共47页，星期日，2025年，2月5日培养细菌的价值细菌的分类试验台操作操作规则获得细菌的途径细菌培养和维护获得分离的克隆细菌计数贮藏污染第11页，共47页，星期日，2025年，2月5日五细菌培养和维护摇瓶培养和固定培养液体培养、半固体培养和固体培养2细菌培养的方法1了解所培养微生物的生理知识第12页，共47页，星期日，2025年，2月5日大肠杆菌在液体培养基中的正常生长曲线滞后期稳定期对数期死亡期第13页，共47页，星期日，2025年，2月5日3培养基的分类

按用途分类基础培养基完全培养基鉴别培养基选择培养基厌氧培养基按物理性状分类液体培养基：不含凝固剂，用于增菌和接种纯种细菌。半固体培养基：含0.3％～0.5％琼脂。用于观察细菌动力、保存菌种。固体培养基：平板、斜面。含2％～2.5％琼脂。平板：用于细菌的分离培养。斜面：用于纯培养、保存菌种。第14页，