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实验动物学繁殖技术操作规程
一、概述
实验动物学繁殖技术操作规程是保障实验动物繁殖质量、提高繁殖效率、确保实验动物遗传稳定性的重要技术规范。本规程旨在指导实验动物繁殖过程中的各项操作,包括准备阶段、执行阶段和后续管理,以确保实验结果的准确性和可重复性。规程内容涵盖设备准备、动物选择、配种管理、妊娠监测、后代处理等关键环节,适用于各类实验动物(如小鼠、大鼠、兔子等)的繁殖研究。
二、操作准备
(一)设备与环境准备
1.确认繁殖设备(如饲养笼、配种笼、妊娠笼)清洁、消毒合格,并符合实验动物饲养标准。
2.检查环境温度(18–24℃)、湿度(40–60%)和光照周期(12小时明暗交替),确保符合动物生长需求。
3.准备必要的辅助工具,包括记录表格、称重设备、麻醉药品(如异氟烷)、输精管等。
(二)动物选择与健康检查
1.选择成年健康实验动物,雌性体重不低于体型的标准范围(如小鼠250–300g,大鼠350–400g)。
2.检查动物外观(毛发光滑、无脱毛、无皮肤病)、行为(活跃、无异常动作)和生理指标(心率、呼吸正常)。
3.进行检疫隔离,确保动物无传染性疾病(如沙门氏菌、支原体感染)。
(三)配种前准备
1.雌性动物需进行发情鉴定,常用方法包括观察阴部红肿程度、行为活跃度(如接受爬跨)或阴道涂片检查(出现核固缩细胞)。
2.雄性动物需评估性成熟度,通常以睾丸完全下降、精液质量合格为标准。
3.记录动物基本信息(编号、品种、出生日期、遗传背景),建立繁殖档案。
三、繁殖操作流程
(一)自然繁殖
1.将发情雌雄动物按1:1比例放入配种笼,确保雄性优先交配。
2.配种后次日检查阴部是否留有精液痕迹,确认受孕。
3.受孕雌性移至妊娠笼,记录配种日期,避免干扰。
(二)人工授精
1.**精液采集与处理**:
(1)用消毒棉球刺激雄性动物阴囊,引导射精。
(2)收集精液,立即置于37℃恒温条件下,混匀后置于显微镜下评估精子活力(≥80%前向运动)。
(3)按需稀释精液(如加入等量稀释液),避免过度稀释影响受孕率。
2.**授精操作**:
(1)用输精管将精液缓慢注入雌性阴道深处(约1–2cm)。
(2)授精后轻抚雌性腹部,防止精液外溢。
(3)记录授精时间与剂量。
(三)妊娠监测
1.配种后第1–2天检查雌性是否受孕(自然繁殖可通过精液痕迹判断,人工授精需结合妊娠试验)。
2.受孕后每日监测雌性体重变化(如妊娠期小鼠体重增加约10–15%)。
3.妊娠期避免剧烈抓取或惊吓,减少流产风险。
四、后代管理与记录
(一)产仔处理
1.产仔前1天更换产仔笼,铺好消毒垫料(如木屑或无尘纸)。
2.产后检查幼仔数量、存活情况,记录初生体重(如小鼠3–5g)。
3.母鼠产后需补充营养(如增加蛋白质饲料),观察哺乳行为。
(二)数据记录与档案更新
1.每日记录繁殖日志,包括配种成功率、产仔数、死胎率、畸形率等关键指标。
2.对后代进行编号、标记(如耳号),建立个体档案。
3.定期汇总数据,分析繁殖效率,优化操作流程。
(三)动物处置
1.仔鼠断奶后按实验需求分组或继续饲养,不合格个体(如畸形、生长迟缓)需及时隔离或安乐死。
2.更换笼具、垫料等用品时需严格消毒,防止交叉感染。
五、注意事项
1.操作全程需佩戴消毒手套,避免人为污染。
2.实验动物应激反应可能影响繁殖结果,需轻柔处理。
3.定期核对动物编号与记录,防止混淆。
4.设备使用后需及时清洁,金属器械需灭菌处理。
一、概述
实验动物学繁殖技术操作规程是保障实验动物繁殖质量、提高繁殖效率、确保实验动物遗传稳定性的重要技术规范。本规程旨在指导实验动物繁殖过程中的各项操作,包括准备阶段、执行阶段和后续管理,以确保实验结果的准确性和可重复性。规程内容涵盖设备准备、动物选择、配种管理、妊娠监测、后代处理等关键环节,适用于各类实验动物(如小鼠、大鼠、兔子等)的繁殖研究。
二、操作准备
(一)设备与环境准备
1.确认繁殖设备(如饲养笼、配种笼、妊娠笼)清洁、消毒合格,并符合实验动物饲养标准。
(1)饲养笼材质需为易清洁、耐腐蚀的塑料或不锈钢,底部设有漏粪板,确保排泄物及时排出。
(2)配种笼需设有隔离栏或隔板,防止雌雄动物在非配种时段接触,同时便于观察交配行为。妊娠笼需空间宽敞,便于母鼠活动,并设有产仔箱(建议使用带盖产仔箱,底部铺有无菌垫料)。
(3)所有笼具需定期消毒,常用消毒剂为70%乙醇溶液或稀释后的次氯酸钠溶液(浓度范围:0.1–0.5%),消毒后需自然风干或烘干。
2.检查环境温度(18–24℃)、湿度(40–60%)和光照周期(12小时明暗交替),确保符合动物生长需求。
(1)温度波动范围应控制在±2℃,避免极端温度影响
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