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调脂颗粒联合扶正法对肝细胞脂质代谢关键受体的影响研究
一、引言
1.1研究背景
高胆固醇血症作为一种常见的代谢性疾病,近年来其发病率呈显著上升趋势。2017年,中国疾控中心研究人员通过比较2002年和2010-2012年国人营养与健康相关数据发现,十年来国人的高胆固醇血症患病率增加了约3倍,总胆固醇水平从2002年的3.93mmol/L上升到2012年的4.62mmol/L,高胆固醇血症的患病率从1.6%上升到6%,其中女性和55岁以上居民高胆固醇血症更为严峻。高胆固醇血症对人体健康危害极大,它是形成动脉粥样硬化斑块的重要前提,而粥样斑块又是导致心脑血管疾病的主要基础。过高的胆固醇容易损害动脉管壁,脂质沉积在动脉壁上,增加动脉粥样硬化的发生风险,进而可能发展形成冠心病,导致心肌缺血,出现心绞痛,甚至猝死等症状,还可能造成血管堵塞,引起心、脑、肾脏等重要脏器缺血,引发各种心脑血管疾病。
调脂颗粒是一种由中药植物提取物组成的中成药,具有降血脂、抗氧化、抗炎等多种生物活性成分,已被广泛用于临床治疗高脂血症等相关疾病。其作用机制主要是通过调节脂质代谢途径,增加脂质降解和代谢,从而降低血液中的胆固醇和三酰甘油等脂质物质的浓度。扶正法是中医治疗疾病的一种重要方法,通常用于治疗虚证,如气血两虚、阴阳两虚等,其主要作用是调整体内的阴阳、气血、脏腑的生理功能,增强机体的自身抗病能力。在临床治疗中,扶正法常与其他治疗方法联合使用,以提高治疗效果。
尽管在治疗高胆固醇血症的过程中,已经有一些扶正法被用于帮助患者恢复身体的平衡和健康,但目前很少有研究探讨调脂颗粒联合不同扶正法对肝细胞的影响。肝脏是脂质代谢的关键器官,Lo-2人肝细胞株是研究脂质代谢的常用细胞模型,B类Ⅰ型清道夫受体在肝细胞脂质代谢中发挥着重要作用,它能够识别并结合多种配体,参与胆固醇的逆向转运等过程。因此,研究调脂颗粒联合不同扶正法对Lo-2人肝细胞株B类Ⅰ型清道夫受体表达的影响,对于深入了解脂质代谢机制以及开发更有效的高胆固醇血症治疗方法具有重要意义。
1.2研究目的与意义
本研究旨在探究调脂颗粒联合不同扶正法对Lo-2人肝细胞株B类Ⅰ型清道夫受体表达的影响。通过构建Lo-2人肝细胞株B类Ⅰ型清道夫受体表达的模型,选择不同的调脂颗粒和扶正法进行处理,检测细胞中B类Ⅰ型清道夫受体的表达水平,筛选出合适的处理方案,从而明确调脂颗粒联合不同扶正法对该受体表达的具体作用。
本研究具有重要的理论和实际意义。在理论方面,有助于深入探究调脂颗粒和扶正法对脂质代谢的调节机制,为进一步揭示人体脂质代谢的生理和病理机制提供新的思路和研究路径。在实际应用中,能够为临床治疗高胆固醇血症提供新的治疗思路和理论支持,为解决高胆固醇血症的治疗难点提供一定的基础,有望通过联合治疗的方式提高高胆固醇血症的治疗效果,改善患者的健康状况,降低心脑血管疾病等并发症的发生风险。
二、材料与方法
2.1实验材料
2.1.1细胞株
本实验选用的Lo-2人肝细胞株,来源于正常人体肝脏组织,由中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库提供。该细胞株具有典型的肝细胞形态学特征,呈上皮样贴壁生长,生长状态良好,能够稳定传代,且具有正常肝细胞的代谢功能,如参与脂质代谢、药物代谢等过程,常被用于肝脏相关疾病及药物作用机制的研究,是研究脂质代谢相关机制的常用细胞模型。
2.1.2主要试剂与仪器
调脂颗粒由[具体厂家]生产,其主要成分为[详细成分],经鉴定纯度符合实验要求。不同扶正法相关药物包括[列举具体扶正法药物及厂家]。胎牛血清(FBS)购自[品牌],DMEM培养基为[品牌]产品,胰蛋白酶、EDTA、青霉素-链霉素双抗溶液均购自[具体公司]。Lipofectamine3000转染试剂购自[品牌],用于质粒转染实验。TRIzol试剂、逆转录试剂盒、实时荧光定量PCR试剂盒均为[品牌]产品,用于RNA提取及mRNA表达检测。兔抗人B类Ⅰ型清道夫受体多克隆抗体购自[公司],HRP标记的山羊抗兔IgG二抗购自[品牌],用于Westernblotting检测蛋白表达。
实验用到的仪器设备包括:二氧化碳培养箱([品牌及型号]),用于维持细胞培养所需的稳定环境;超净工作台([品牌及型号]),提供无菌操作空间;倒置显微镜([品牌及型号]),用于观察细胞形态及生长状态;低温高速离心机([品牌及型号]),用于细胞及蛋白样品的离心处理;实时荧光定量PCR仪([品牌及型号]),进行基因表达的定量分析;电泳仪([品牌及型号])和凝胶成像系统([品牌及型号]),
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