胚胎干细胞分化机制及关键因子研究.pdfVIP

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Cell

第三章胚胎干细胞与分化

•概述

•干细胞

•转分化和组织分化

刘永

江苏省脑病生物信息重点

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Overviewofthebirth,lineage,anddeathofcells

§3.1概述

❖细胞处于不同环境会表达不同,由于表达改变而

使前体细胞变为不同的特化细胞的过程分化

❖一些生物的卵或早期胚胎细胞的胞浆中,含有决定谱

系的物质，称决定子（determinants）

❖一般认为哺乳动物第一次细胞谱系特化发生在致密桑椹胚

形成囊胚时

❖囊胚含有两种形态上不同的细胞：外层的滋养层细胞和内

细胞团细胞。内细胞团主要产生本身和一些胚外组织，

滋养层主要产生胎盘组织

❖细胞在胚胎中的空间位置决定了内细胞团和滋养层的特化

（specification）

❖克隆研究表明，大多数成年细胞核（除了免疫细胞和红细

胞外）可以是全能的，在特定细胞质环境中可能重演胚胎

发生或极改变其分化状态

•内细胞团和滋养层细胞的特化取决于细胞在胚胎中的空间

位置

多能性的决定因子

1、Oct-3在胚胎干细胞内的功能

❖POU转录因子Oct-3最初在胚胎细胞中发现，后

发现Oct-3的表达严格局限于多能细胞中

❖敲除Oct-3的小鼠在胚胎3.5天即，不能形成具有

发育多能性的内细胞团细胞

❖胚胎干细胞Oct-3的表达在特定水平才能保持其多能状态；

这一水平2倍时，细胞分化为原始内胚层、中胚层细胞；

50%时，去分化为滋养层细胞

2、Oct-3的功能域

❖352AA，2个结合功能域（POU特异性功能域、

POU同源功能域），结合多种序列（包括八聚体模

序ATGCAAAT、AT富有序列）。

❖两端有反式激活功能域，任一激活功能域与适合的POU功

能域结合即具有Oct-3的功能

❖干细胞表型维持需要Oct-3的结合能力，而分化时则

不需要

SH

3、Oct-3的靶

❖利用敲除或靶向灭活等方法研究其表达及确切作用

❖一些与维持胚胎干细胞表型有关的(P505)，如FGF-4,

Opn,Utf1等

❖Opn（一种细胞外基质成分）与细胞迁移有关；cdx-2,

hand-1等与胎盘发生有关

4、共同作用因子

❖转录因子和不同的共同作用因子相互作用而表现转

录调节活性，已发现的Oct-3共同作用因子有：

腺EIA：在激活异种细胞的人工启动子时作为Oct-3

和基础转录机的桥连因子

Sox-2：Sox-2与Oct-3共同激活fgf-4、utf-1增强子，而抑制

Oct-3同型二聚体对opn增强子的激活

Oct与共同作用因子之间的平衡十分重要，其相互作用存在

抑制现象:

❖Oct-3、EIA和基础转录机形成三元复合体，过量的Oct-3

或EIA分别占据了结合位点或表面，由于过饱和而抑制了

活性三元复合体的形成，从而不能激活靶启动子