高效液相色谱法讲座黄小忠.pptxVIP

高效液相色谱法（三）主讲人：黄小忠

目录HPLC的主要类型及选择01高效液相色谱仪02高效液相色谱的基本理论和实验技术03

在高效液相色谱中,液体的扩散系数仅为气体的万分之一1）液体的黏度比气体大一百倍，密度为气体的一千倍，故降低传质阻力是提高柱效主要途径2）采用粒度小、填充均匀固定相可提高柱效3）液相色谱中，不可能通过增加柱温来改善传质4）采用粘度小、低流速的流动相可降低传质阻力项，提高柱效1、速率理论高效液相色谱的基本理论和实验技术

（1）溶剂的纯化（2）流动相的脱气（3）流动相的过滤溶剂处理技术（1）干法（2）匀浆填充法色谱柱的制备改进复杂样品的分离，改善峰形，减少脱尾，缩短分析时间梯度洗脱技术紫外-可见衍生化、荧光衍生化衍生化技术前处理的必要性。萃取、过滤、结晶、固相萃取等简单的分离方法，尽可能多的去掉杂质样品的预处理技术高效液相色谱的基本理论和实验技术2、实验技术

固定相与装柱方法的选择选粒径小的、分布均匀的球形固定相,首选化学键合相，匀浆法装柱流动相及其流速的选择选粘度小、低流速的流动相—甲醇柱温的选择选室温25℃左右高效液相色谱的基本理论和实验技术3、HPLC法中分离条件的选择

定性方法（1）利用已知标准品定性（2）利用检测器的选择性定性（3）利用紫外检测器全波长扫描功能定性定量方法（1）归一化法（2）外标法（3）内标法高效液相色谱的基本理论和实验技术4、定性与定量方法

环境中有机氯农药残留量分析固定相：薄壳型硅胶(37～50?m)流动相：正己烷流速：1.5mL/min色谱柱：50cm?2.5mm(内径)检测器：差示折光检测器可对水果、蔬菜中的农药残留量进行分析高效液相色谱的基本理论和实验技术5、HPLC的应用

稠环芳烃的分析稠环芳烃多为致癌物质固定相：十八烷基硅烷化键合相流动相：20%甲醇-水～100%甲醇线性梯度淋洗，2%/min流速：1mL/min柱温：50oC柱压：70?104Pa检测器：紫外检测器高效液相色谱的基本理论和实验技术5、HPLC的应用

谢谢！