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凝血四项检测原理（推荐）

凝血四项是临床常用的一组凝血功能检测项目，主要包括凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）和凝血酶时间（TT）。以下详细介绍其检测原理。

凝血酶原时间（PT）检测原理

凝血机制基础

凝血过程是一个复杂的生理过程，主要分为内源性凝血途径、外源性凝血途径和共同凝血途径。外源性凝血途径是指从组织因子（TF）释放到形成TFⅦa复合物的过程。组织因子是一种跨膜糖蛋白，广泛存在于血管外组织细胞表面。当血管受损时，组织因子暴露于血液中，与血液中的凝血因子Ⅶ结合，形成TFⅦa复合物。该复合物具有激活凝血因子Ⅹ的能力，从而启动外源性凝血途径。

PT检测的具体原理

在体外检测PT时，向受检血浆中加入过量的组织凝血活酶（含组织因子）和适量的钙离子。组织凝血活酶中的组织因子与血浆中的凝血因子Ⅶ结合，形成TFⅦa复合物。这个复合物迅速激活凝血因子Ⅹ，使其转变为活化的凝血因子Ⅹa。在钙离子的存在下，Ⅹa与因子Ⅴ、磷脂（来自组织凝血活酶和血小板膜）结合形成凝血酶原酶复合物。凝血酶原酶复合物可以将凝血酶原（因子Ⅱ）激活为凝血酶（Ⅱa）。凝血酶具有多种作用，其中最重要的是将纤维蛋白原（因子Ⅰ）转变为纤维蛋白单体。这些纤维蛋白单体在因子ⅩⅢa和钙离子的作用下，交联形成稳定的纤维蛋白多聚体，从而使血浆发生凝固。从加入组织凝血活酶和钙离子到血浆开始凝固所需的时间即为凝血酶原时间。

影响PT检测的因素

1.试剂因素：不同来源和质量的组织凝血活酶对PT检测结果有显著影响。组织凝血活酶的活性、纯度和稳定性等都会影响其与凝血因子的反应速度和效果。因此，在临床检测中，需要使用标准化的组织凝血活酶试剂，并定期进行校准和质量控制。

2.样本因素：血浆样本的采集、处理和保存方法对PT检测结果也有重要影响。采血时应避免标本溶血、凝血和混入组织液，因为这些因素都会导致检测结果不准确。样本采集后应尽快分离血浆，并在规定的时间内进行检测。如果需要保存样本，应在低温条件下保存，但保存时间不宜过长，以免影响凝血因子的活性。

3.生理和病理因素：某些生理和病理状态会影响PT检测结果。例如，维生素K缺乏、肝病、口服抗凝药物等会导致凝血因子合成减少或功能异常，从而使PT延长；而血栓前状态、弥散性血管内凝血（DIC）早期等则可能导致PT缩短。

活化部分凝血活酶时间（APTT）检测原理

内源性凝血途径机制

内源性凝血途径是指从因子Ⅻ被激活到形成因子Ⅹa的过程。当血液与带负电荷的异物表面接触时，因子Ⅻ被激活为Ⅻa。Ⅻa可以激活因子Ⅺ，使其转变为Ⅺa。Ⅺa在钙离子的参与下激活因子Ⅸ，形成Ⅸa。Ⅸa与因子Ⅷ、磷脂和钙离子结合形成复合物，即因子Ⅹ酶复合物，该复合物可以激活因子Ⅹ，使其转变为Ⅹa，进而进入共同凝血途径。

APTT检测的具体原理

在APTT检测中，向受检血浆中加入活化剂（如硅藻土、白陶土等）和部分凝血活酶（含磷脂），然后加入适量的钙离子。活化剂可以激活血浆中的因子Ⅻ，启动内源性凝血途径。部分凝血活酶中的磷脂为凝血反应提供了催化表面，促进凝血因子之间的相互作用。加入钙离子后，内源性凝血途径中的一系列凝血因子依次被激活，最终形成凝血酶，使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，导致血浆凝固。从加入钙离子到血浆开始凝固所需的时间即为活化部分凝血活酶时间。

影响APTT检测的因素

1.试剂因素：活化剂和部分凝血活酶的质量和活性对APTT检测结果有重要影响。不同的活化剂和部分凝血活酶试剂可能具有不同的激活能力和反应特性，因此在使用前需要进行性能验证和校准。

2.样本因素：与PT检测类似，血浆样本的采集、处理和保存方法对APTT检测结果也有显著影响。样本的溶血、凝血和混入组织液等情况会导致检测结果不准确。此外，样本中肝素等抗凝物质的存在也会使APTT延长。

3.生理和病理因素：许多生理和病理状态会影响APTT检测结果。例如，血友病A（因子Ⅷ缺乏）、血友病B（因子Ⅸ缺乏）等遗传性凝血因子缺乏症会导致APTT显著延长；而系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病可能会产生抗磷脂抗体，影响内源性凝血途径，使APTT延长。此外，DIC、肝脏疾病等也会影响凝血因子的合成和功能，导致APTT异常。

纤维蛋白原（FIB）检测原理

纤维蛋白原的生理功能

纤维蛋白原是一种由肝脏合成的血浆糖蛋白，在凝血过程中起着至关重要的作用。它是凝血酶的底物，在凝血酶的作用下，纤维蛋白原可以被裂解为纤维蛋白单体。这些纤维蛋白单体在因子ⅩⅢa和钙离子的作用下，交联形成稳定的纤维蛋白多聚体，从而形成血栓，起到止血和修复受损血管的作用。

FIB检测的常用方法及原理

1.Clauss法：这是目前临床检测纤维蛋白原最常用的方法。其原理是向受检血浆中加入标准化的凝血酶溶液，在一定条件下，凝血酶迅