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一代测序相关题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.一代测序技术中，双脱氧核苷酸的作用是（）

A.作为DNA合成的原料

B.终止DNA合成

C.促进DNA合成

D.增强DNA稳定性

答案：B

解析：双脱氧核苷酸缺少3-OH，可掺入到新合成的DNA链中，导致DNA合成终止，用于确定DNA序列。

2.Sanger测序法中使用的引物是（）

A.随机引物

B.特异性引物

C.通用引物

D.发夹引物

答案：B

解析：Sanger测序需要特异性引物与模板结合，引导DNA合成从而确定序列。

3.一代测序反应体系中，DNA聚合酶的作用是（）

A.解开DNA双链

B.连接DNA片段

C.催化dNTP聚合形成DNA链

D.修饰DNA碱基

答案：C

解析：DNA聚合酶以dNTP为原料，按照模板序列催化合成新的DNA链。

4.以下哪种物质不是一代测序反应体系所必需的（）

A.dNTP

B.ddNTP

C.RNA引物

D.Taq酶

答案：C

解析：一代测序用的是DNA引物，不是RNA引物，dNTP、ddNTP、DNA聚合酶是必需的。

5.一代测序时，DNA模板变性的目的是（）

A.使DNA降解

B.打开双链便于引物结合

C.修饰DNA结构

D.增加DNA浓度

答案：B

解析：变性可使双链DNA解开成单链，利于引物与模板特定区域结合。

6.测序反应产物通过什么方法进行分离（）

A.凝胶电泳

B.离子交换色谱

C.亲和色谱

D.高效液相色谱

答案：A

解析：凝胶电泳可根据片段大小分离不同长度的测序产物。

7.一代测序中，读取DNA序列的依据是（）

A.条带颜色

B.条带位置

C.条带亮度

D.条带形状

答案：B

解析：不同长度的测序产物在凝胶上位置不同，根据位置读取序列。

8.用于标记测序引物的物质通常是（）

A.荧光染料

B.放射性同位素

C.生物素

D.地高辛

答案：B

解析：放射性同位素可用于标记引物，便于检测测序产物。

9.一代测序技术的优点不包括（）

A.准确性高

B.通量高

C.操作简单

D.结果直观

答案：B

解析：一代测序通量低，准确性高、操作简单、结果直观是其优点。

10.以下哪种情况可能导致测序结果不准确（）

A.引物设计不合理

B.DNA模板浓度过高

C.反应体系中dNTP过量

D.以上都可能

答案：D

解析：引物设计不合理无法有效结合模板，模板浓度过高或dNTP过量都可能影响测序准确性。

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.一代测序技术包括（）

A.Sanger测序法

B.Maxam-Gilbert化学降解法

C.焦磷酸测序法

D.罗氏454测序技术

答案：AB

解析：Sanger测序法和Maxam-Gilbert化学降解法是经典的一代测序技术，焦磷酸测序法和罗氏454测序技术属于新一代测序技术。

2.Sanger测序反应体系中包含（）

A.DNA模板

B.引物

C.dNTP

D.ddNTP

答案：ABCD

解析：这些都是Sanger测序反应体系的基本组成成分，共同作用完成DNA序列测定。

3.一代测序的应用领域有（）

A.基因分型

B.突变检测

C.遗传疾病诊断

D.转录组分析

答案：ABC

解析：一代测序常用于基因分型、突变检测及遗传疾病诊断，转录组分析常用二代测序技术。

4.测序反应中，影响DNA合成的因素有（）

A.DNA模板质量

B.引物浓度

C.DNA聚合酶活性

D.dNTP与ddNTP比例

答案：ABCD

解析：这些因素都会对DNA合成产生影响，进而影响测序结果。

5.一代测序结果分析时需要注意（）

A.峰图质量

B.序列准确性

C.信号强度

D.测序长度

答案：ABCD

解析：这些方面都关乎测序结果的可靠性和可解读性。

6.与一代测序相比，新一代测序技术的优势在于（）

A.通量高

B.成本低

C.速度快

D.读长更长

答案：ABC

解析：新一代测序通量高、成本低、速度快，但读长相对一代测序短。

7.一代测序中，DNA聚合酶的特性包括（）

A.具有5→3聚合活性

B.具有3→5外