植物胚胎培养与离体授粉.pptxVIP

植物胚胎培养和离体授粉

Embryocultureandinvitropollinationofplant;植物胚胎培养概念;Shapeofseed;Color,WeightandSizeVariationsinSeeds;Structureofseed;胚乳?(Endosperm)：有或无。胚乳种子中储藏营养物质的薄壁组织。

依种子在成熟时是否具有胚乳，将种子分为两种类型：

有胚乳种子（albuminousseed）

无胚乳种子（exalbuminousseed）;;Structureofseed;Structureofseed;种子的来源;双受精;种子的来源;植物胚胎培养：指胚(成熟胚或未成熟胚)或具胚器官在离体无菌条件下进行培养，以获得发育正常的植株的技术。

;植物胚胎培养的类型：;无菌条件下将胚从胚珠（幼胚）或种子中（成熟胚）分离出来，置于培养基上进行离体培养获得再生植株的方法。;;植物胚的发育过程;;;（一）成熟胚培养

;牡丹成熟胚的离体培养与快速繁殖

Matureembryocultureandrapidpropagationoftreepeony;（二）幼胚培养;1.幼胚培养步骤;2.幼胚离体培养中常见的生长发育方式;早熟萌发(earlymaturesprouting)——幼胚接种后，离体胚不继续胚性生长，而是在培养基上迅速萌发成幼苗，通常称为早熟萌发。;3.影响幼胚培养的因素;B、蔗糖：

糖的作用：

调节渗透压；碳源；防止幼胚早萌。

渗透压的保持对于幼胚培养相当重要，幼胚需要蔗糖浓度较高。最适蔗糖浓度随着胚的发育时期而降低。

;胚发育早期要求较高的的渗透压，而随着胚的发育逐渐降低。;C、植物激素的作用：

低浓度的GA能促进幼胚的早熟萌发。有时GA还具有胚柄的作用。

低浓度生长素对幼胚生长有促进作用，高浓度则有抑制作用。;D、天然提取物及某些蛋白制品的作用

银杏幼胚培养中添加银杏胚乳有促进作用（李继侗，1934）；

曼佗罗幼胚培养中发现添加椰子乳能很好的促进幼胚的发育(200-500um的幼胚)（1941）。

此外，大麦胚乳、麦芽提取物、酵母提取物、水解酪蛋白等都能促进幼胚的发育。;2）胚胎发育时期

一般胚龄越小，越难培养；

双子叶植物：心形胚期以后的胚较易培养

禾谷类植物：梨形胚期（受精后8d左右，0.5mm以上）后较易培养;3）培养条件

A、温度：多数为25-30℃，以该植物种子萌发的适宜温度为好。

B、光照：??多数处于球形期至心形期的幼胚，需要在黑暗条件下培养两周后再给予光照，早期光照不利于胚根发育，但胚芽发育需要光照.

C、pH：不同种类植物和不同发育时期的幼胚对pH的要求不同。;例：荠菜胚的培养过程;?取出连着胚柄的完整胚（较老胚在胚珠上无胚的一侧切一小口，用钝头解剖针轻压珠被）

?把完整的胚挤出到周围的液体中

?接种到培养基上

?暗培养幼胚发育到鱼雷形阶段

?转移到降低蔗糖浓度（2~3%）的同样培养基上

?光培养至发育成熟

?新的植株;3、植物胚胎培养的应用;;二、胚珠和子房培养;（一）胚珠培养;（二）子房培养;（二）子房培养;我们目前所知道的植物激素对棉花纤维生长发育的作用都是来源于子房培养的研究。生长素和GA会促进未受精的子房中纤维的生长。

;（三）未传粉子房和胚珠培养产生单倍体;;

;（二）概述

胚乳培养的最早研究始于1933年，Lampe和Mills首例进行了玉米胚乳培养。胚乳培养的研究主要集中在以下一些问题的探讨：;;;影响胚乳培养的因素

基因型

胚乳的发育时期

培养条件;A、胚乳发育时期的影响

发育早期胚乳：操作不便，诱导率低

游离核期或刚转入细胞期的核型胚乳：难获得愈伤

旺盛生长期（细胞形成期）胚乳：易诱导产生callus

成熟期胚乳：已高度分化，很难诱导脱分化;一、胚乳的发育（初生胚乳核胚乳）

（一）核型胚乳：

初生胚乳核核分裂多数游离核质分裂多细胞的胚乳

（二）细胞型胚乳：

初生胚乳核核分裂、质分裂多细胞的胚乳

（三）沼生目型胚乳

珠孔室(大)游离核胞质分裂多细胞

初生胚乳核第一次分裂胚囊分成

合点室(小)游离核;★旺盛期胚乳特征：

§胚已分化完成

§胚乳已形成细胞组织

§充分生长，达到成熟大小