林木干旱胁迫转录因子 NAC 靶基因验证双荧光素酶试题库及答案.docVIP

林木干旱胁迫转录因子NAC靶基因验证双荧光素酶试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.双荧光素酶报告基因检测中，常用的内参荧光素酶是（）

A.萤火虫荧光素酶B.海肾荧光素酶C.Renilla荧光素酶D.以上都不是

2.验证转录因子NAC与靶基因结合，构建报告基因载体时，靶基因的（）区域常被克隆到报告基因上游。

A.编码区B.3’UTRC.启动子D.内含子

3.以下哪种试剂常用于细胞转染进行双荧光素酶实验（）

A.乙醇B.氯化钙C.LipofectamineD.蛋白酶K

4.双荧光素酶实验结果主要通过检测（）来分析

A.吸光度B.荧光强度C.蛋白含量D.核酸浓度

5.转录因子NAC识别靶基因启动子上的（）元件

A.密码子B.反密码子C.顺式作用元件D.内含子剪接位点

6.在林木干旱胁迫研究中，双荧光素酶实验可用于验证（）

A.基因表达量B.转录因子与靶基因互作C.蛋白活性D.细胞增殖

7.构建双荧光素酶报告基因载体需要使用（）

A.限制性内切酶和DNA连接酶B.蛋白酶和淀粉酶C.RNA聚合酶D.解旋酶

8.实验中设置阴性对照的目的是（）

A.检测实验误差B.增强实验效果C.提高基因表达D.降低背景荧光

9.若转录因子NAC激活靶基因表达，双荧光素酶实验结果可能是（）

A.萤火虫荧光素酶活性降低B.海肾荧光素酶活性升高C.萤火虫荧光素酶活性升高D.两者荧光素酶活性都降低

10.进行双荧光素酶实验时，细胞培养的条件一般是（）

A.37℃，5%CO?B.25℃，10%CO?C.4℃，5%CO?D.30℃，10%CO?

答案：1.B2.C3.C4.B5.C6.B7.A8.A9.C10.A

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.双荧光素酶报告基因系统的优点有（）

A.灵敏度高B.线性范围广C.检测快速D.可同时检测多个基因

2.构建转录因子NAC表达载体时，需要考虑的因素有（）

A.启动子强度B.融合标签C.终止子D.载体抗性

3.在双荧光素酶实验中，影响实验结果的因素包括（）

A.细胞状态B.转染效率C.试剂质量D.培养时间

4.用于验证转录因子NAC靶基因的技术有（）

A.双荧光素酶实验B.ChIP实验C.EMSA实验D.Westernblot实验

5.以下哪些属于转录因子NAC的功能（）

A.参与干旱胁迫响应B.调控基因转录C.促进蛋白质合成D.调节细胞代谢

6.双荧光素酶实验中使用的载体类型有（）

A.报告基因载体B.转录因子表达载体C.空载对照载体D.干扰载体

7.选择细胞系进行双荧光素酶实验时，需要考虑（）

A.细胞来源B.细胞对转染的敏感性C.细胞内源性荧光D.细胞生长速度

8.转录因子NAC与靶基因结合后可能的作用是（）

A.激活基因转录B.抑制基因转录C.改变DNA结构D.促进mRNA降解

9.实验过程中，为保证结果准确性可采取的措施有（）

A.重复实验B.设立多个对照组C.优化实验条件D.更换实验人员

10.双荧光素酶实验可应用于（）

A.基因功能研究B.药物靶点筛选C.信号通路解析D.植物品种改良

答案：1.ABC2.ABCD3.ABCD4.ABC5.ABD6.ABC7.ABC8.AB9.ABC10.ABCD

三、判断题（每题2分，共10题）

1.双荧光素酶实验只能检测转录因子对靶基因的激活作用。（）

2.构建报告基因载体时，克隆的靶基因启动子区域越长越好。（）

3.转染效率不影响双荧光素酶实验结果。（）

4.转录因子NAC可以直接结合到靶基因的编码区。（）

5.海肾荧光素酶作为内参，其活性应该保持稳定。（）

6.双荧光素酶实验中不需要设置阳性对照。（）

7.不同的细胞系对双荧光素酶实验结果可能有影响。（）

8.转录因子NAC与靶基因结合具有特异性。（）

9.实验中荧光强度的变化可以直接反映转录因子与靶基因的互作。（）

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