林木基因编辑 CRISPR-CasΦ 系统载体构建与效率检测试题库及答案.docVIP

林木基因编辑CRISPR-CasΦ系统载体构建与效率检测试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.CRISPR-CasΦ系统中的CasΦ蛋白主要功能是？

A.识别sgRNA

B.切割DNA

C.结合启动子

D.转运RNA

答案：B

2.构建载体时常用的工具酶是？

A.淀粉酶

B.限制性内切酶

C.蛋白酶

D.脂肪酶

答案：B

3.检测基因编辑效率常用方法是？

A.重量法

B.荧光定量PCR

C.比色法

D.沉淀法

答案：B

4.sgRNA与目标DNA结合靠的是？

A.共价键

B.离子键

C.碱基互补配对

D.氢键

答案：C

5.以下哪种是载体构建常用的细菌？

A.大肠杆菌

B.金黄色葡萄球菌

C.肺炎链球菌

D.乳酸菌

答案：A

6.基因编辑过程中，修复断裂DNA的机制不包括？

A.同源重组

B.非同源末端连接

C.碱基切除修复

D.糖基化修复

答案：D

7.用于转化载体进入细胞的方法是？

A.离心法

B.电穿孔法

C.过滤法

D.透析法

答案：B

8.构建载体的基本步骤顺序是？

A.酶切、连接、转化

B.连接、酶切、转化

C.转化、酶切、连接

D.酶切、转化、连接

答案：A

9.检测载体是否成功导入细胞常用的是？

A.标记基因检测

B.蛋白含量检测

C.细胞大小检测

D.细胞活力检测

答案：A

10.CRISPR-CasΦ系统相比其他系统优势在于？

A.蛋白体积小

B.效率低

C.特异性差

D.操作复杂

答案：A

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.构建载体所需的元件有（）

A.启动子

B.终止子

C.多克隆位点

D.抗性基因

答案：ABCD

2.检测基因编辑效率的技术有（）

A.测序

B.酶切分析

C.荧光报告系统

D.免疫印迹

答案：ABC

3.影响CRISPR-CasΦ系统编辑效率的因素有（）

A.sgRNA设计

B.细胞类型

C.培养条件

D.载体浓度

答案：ABCD

4.基因编辑过程可能导致的结果有（）

A.基因敲除

B.基因插入

C.碱基替换

D.基因表达上调

答案：ABC

5.载体构建过程中需要注意的事项有（）

A.酶切位点选择

B.防止载体自连

C.片段连接顺序

D.载体大小

答案：ABC

6.以下哪些是基因编辑的应用领域（）

A.作物改良

B.疾病治疗

C.生物制药

D.环境保护

答案：ABCD

7.常用于转化载体的方法有（）

A.化学转化法

B.农杆菌介导法

C.显微注射法

D.超声法

答案：ABC

8.sgRNA设计需要考虑的因素有（）

A.特异性

B.长度

C.二级结构

D.与Cas蛋白结合能力

答案：ABCD

9.检测载体构建是否成功的方法有（）

A.凝胶电泳

B.测序验证

C.酶切鉴定

D.细胞毒性检测

答案：ABC

10.CRISPR-CasΦ系统在林木中的潜在应用包括（）

A.改良木材品质

B.增强抗逆性

C.调控生长周期

D.改变花色

答案：ABC

三、判断题（每题2分，共10题）

1.CRISPR-CasΦ系统只能用于林木基因编辑。（×）

2.载体构建时不需要考虑启动子的强度。（×）

3.基因编辑效率检测只能在细胞水平进行。（×）

4.sgRNA可以随意设计，不影响编辑效果。（×）

5.转化载体进入细胞后一定会成功表达。（×）

6.非同源末端连接修复DNA不会产生错误。（×）

7.载体大小对转化效率没有影响。（×）

8.荧光定量PCR只能检测基因编辑效率。（×）

9.基因编辑可以精确控制基因表达量。（√）

10.CRISPR-CasΦ系统的蛋白可以随意改造。（×）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述构建CRISPR-CasΦ系统载体的主要步骤。

答案：先选择合适载体，用限制性内切酶进行酶切，获得线性载体；再将目的片段如CasΦ基因、sgRNA等与线性载体用连接酶连接；最后通过转化方法将构建好的载体导入宿主细胞。

2.说明检测基因编辑效率的荧光定量PCR原理。

答案：利用荧光标记的引物或探针，在PCR扩增过程中，随着目的基因的扩增，荧光信号增强。通过检测荧光强度，与对照样本比较，从而定量分析基因编辑后基因表达量变化，以此推断编辑效率。

3.简述sgRNA在CRISPR-CasΦ系统中的作用。

答案：sgRNA能与CasΦ蛋白结合形成复合物，凭借其特定碱基序列与目标DNA