林木根际解磷菌有机酸分泌基因启动子功能验证转基因毛状根试题库及答案.docVIP

林木根际解磷菌有机酸分泌基因启动子功能验证转基因毛状根试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.以下哪种是常用的根际解磷菌分离培养基？

A.LB培养基B.牛肉膏蛋白胨培养基C.蒙金娜培养基D.PDA培养基

2.构建转基因毛状根常用的载体是？

A.pBR322B.pUC19C.pBI121D.Ti质粒

3.检测有机酸分泌基因表达量常用的技术是？

A.凝胶成像B.荧光定量PCRC.蛋白质印迹D.酶活性测定

4.毛状根诱导利用的细菌是？

A.大肠杆菌B.农杆菌C.枯草芽孢杆菌D.乳酸菌

5.验证启动子功能的关键步骤是？

A.载体构建B.根际解磷菌培养C.毛状根移栽D.提取基因组DNA

6.筛选转基因毛状根常用的抗生素是？

A.青霉素B.卡那霉素C.链霉素D.庆大霉素

7.启动子功能验证中阴性对照是？

A.转入无启动子载体的毛状根B.野生型毛状根C.转入含启动子载体的毛状根D.未接种细菌的根系

8.用于培养林木根际解磷菌的温度一般是？

A.20℃B.25℃C.30℃D.37℃

9.以下哪种有机酸不是根际解磷菌常见分泌的？

A.柠檬酸B.苹果酸C.乙酸D.核酸

10.提取有机酸分泌基因常用的工具酶是？

A.淀粉酶B.蛋白酶C.限制性内切酶D.脂肪酶

答案：1.C2.D3.B4.B5.A6.B7.A8.B9.D10.C

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.影响根际解磷菌有机酸分泌的因素有（）

A.温度B.土壤pHC.磷源浓度D.光照

2.筛选根际解磷菌的方法有（）

A.透明圈法B.钼锑抗比色法C.平板计数法D.稀释涂布法

3.构建转基因毛状根载体时需要的元件有（）

A.启动子B.目的基因C.终止子D.抗性基因

4.检测转基因毛状根中目的基因整合的方法有（）

A.基因组PCRB.Southern杂交C.荧光定量PCRD.Western杂交

5.常用的植物组织培养激素有（）

A.生长素B.细胞分裂素C.赤霉素D.脱落酸

6.以下属于有机酸分泌基因启动子功能验证步骤的有（）

A.载体构建B.转化农杆菌C.诱导毛状根D.功能分析

7.培养根际解磷菌的培养基成分包括（）

A.碳源B.氮源C.磷源D.微量元素

8.鉴定转基因毛状根是否成功的方法有（）

A.观察毛状根形态B.检测目的基因表达C.检测有机酸分泌量D.测定根际解磷能力

9.根际解磷菌可以通过哪些方式促进磷的吸收（）

A.分泌有机酸B.产生磷酸酶C.改变根际微生物群落D.固定土壤磷

10.毛状根培养过程中可能遇到的问题有（）

A.污染B.生长缓慢C.变异D.生根困难

答案：1.ABC2.AB3.ABCD4.AB5.AB6.ABCD7.ABCD8.ABCD9.ABC10.ABC

三、判断题（每题2分，共10题）

1.根际解磷菌只能通过分泌有机酸来溶解土壤中的磷。（）

2.转基因毛状根与正常根在形态上没有区别。（）

3.启动子功能验证不需要设置对照实验。（）

4.筛选根际解磷菌时，透明圈越大解磷能力越强。（）

5.农杆菌介导转化毛状根只能用在双子叶植物上。（）

6.荧光定量PCR可以直接检测有机酸分泌量。（）

7.培养根际解磷菌的培养基必须是固体培养基。（）

8.转基因毛状根在含有抗生素的培养基上不能生长。（）

9.根际解磷菌的解磷能力不受环境影响。（）

10.验证有机酸分泌基因启动子功能只需要检测目的基因表达。（）

答案：1.×2.×3.×4.√5.×6.×7.×8.×9.×10.×

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述筛选根际解磷菌的主要步骤。

答案：采集根际土壤，制备土壤悬液，将悬液稀释涂布在含难溶性磷源的培养基上，培养后观察形成的透明圈，挑取透明圈大的菌落，进一步复筛验证解磷能力。

2.说明构建转基因毛状根载体的关键步骤。

答案：首先获取有机酸分泌基因及启动子，用限制性内切酶切割目的片段和载体，再用DNA连接酶连接，构建重组载体，之后导入感受态细胞进行扩