食品卫生微生物指标及微生物检测.pptVIP

食品卫生标准;;食品卫生标准中的微生物指标;;菌落总数所指示的食品卫生意义：;检测方法与步骤;;第八页，共九十八页。;第九页，共九十八页。;第十页，共九十八页。;第十一页，共九十八页。;第十二页，共九十八页。;第十三页，共九十八页。;第十四页，共九十八页。;细菌总数的常规检验方法;;;稀释液的选择;培养温度一般为37℃（水产品的培养温度，由于其生活环境水温较低，故多采用30℃）

培养时间一般为48h，有些方法只要求24h的培养即可计数

培养箱应保持一定的湿度，琼脂平板培养48h后，培养基失重不应超过15％

在某些场合，为了防止食品颗粒与菌落混淆不清，可在营养琼脂中加入氯化三苯四氮唑（TTC），培养后菌落呈红色，易于分别;平板计数琼脂培养基（PCA）;;;;;菌落数的报告;方法优点;细菌总数的其它检验方法;涂布平板法;;;涂布法优缺点;点滴平板法

;螺旋平板仪;粪便污染指示菌类;大肠菌群;大肠菌群;大肠菌群MPN值;样品稀释

初发酵试验

复发酵试验;不产气;;;样品稀释

平板计数典型和可疑菌落数

证实试验;图

大

肠

菌

群

平

板

计

数

法

检

验

程

序;;选取菌落数在15CFU～150CFU之间的平板，分别计数平板上出现的典型和可疑大肠菌群菌落。

典型菌落为紫红色，菌落周围有红色的胆盐沉淀环，菌落直径为0.5mm或更大。;大肠菌群在VRBA上的菌落特征;证实试验

从VRBA平板上挑取10个不同类型的典型和可疑菌落，分别移种于BGLB肉汤管内，36℃±1℃培养24h～48h，观察产气情况。凡BGLB肉汤管产气，即可报告为大肠菌群阳性。;大肠菌群平板计数的报告

经最后证实为大肠菌群阳性的试管比例乘以计数的平板菌落数，再乘以稀释倍数，即为每g（mL）样品中大肠菌群数。例：10-4样品稀释液1mL，在VRBA平板上有100个典型和可疑菌落，挑取其中10个接种BGLB肉汤管，证实有6个阳性管，则该样品的大肠菌群数为：100×6/10×104/g（mL）=6.0×105CFU/g（mL）。;乳糖发酵试验

分离培养

证实试验;图大肠菌群检验程序;挑可疑菌落1-2个同时进行;产气实验;ＥＭＢ（伊红美蓝）

琼脂培养基原理;ＥＭＢ培养基成分;ＥＭＢ配制方式;ＥＭＢ培养结果观察;;;粪便污染指示菌之??------粪大肠菌群（faecalcoliforms）或耐热大肠菌群;粪大肠菌群（faecalcoliforms）

或耐热大肠菌群;粪便污染指示菌之三-------大肠杆菌;大肠杆菌指革兰氏阴性无芽孢杆菌、乳糖发酵产酸产气、IMViC试验（靛基质、MR、V-P、柠檬酸盐试验）为++--或-+--的细菌。

与人类有关的大肠杆菌统称为致泻性大肠杆菌，包括五种：肠毒素性大肠杆菌（ETEC）、致病性大肠杆菌（EPEC）、出血性大肠杆菌（EHEC）、侵袭性大肠杆菌（EIEC）、黏附性大肠杆菌（EAEC）。;第六十三页，共九十八页。;;检样;黑色菌落移种营养琼脂斜面;;;;菌落总数和大肠菌群MPN的其他测定方法;膜过滤法;;膜过滤;TTC（2、3、5、—氯化三苯四氮唑）

显色法

;;酵母菌在TTC上的菌落特征;DC(去氧胆酸钠)半固体法

;菌落为红色，周围有红色的菌落胆盐沉淀环，直径为2-3mm或更大;;;;粪便污染指示菌之四-------肠球菌（Enterococcus）;肠球菌分类;自然界分布广，存活力持久

肠球菌普遍存在于自然界，一般栖居在各种温血和冷血动物的腔肠，甚至昆虫体内，也是健康人体的上呼吸道，口腔或肠道的常居菌。本菌可以引起心内膜炎，胆囊炎，脑膜炎，尿路感染及伤口感染等多种疾病。在人类粪便中的数量仅次于大肠菌群，每克成人的粪便中约含２×108个。;肠球菌生物学性状;抵抗力强及耐受性强，生长营养要求不高

目前该菌多作为生活饮用水，管道水和一些水质的指示菌。卫生学家认为，肠球菌类似于大肠菌群的生态活动，但其对恶劣的外环境和冷冻条件具有较强的抵抗力，作为监测水质卫生，环境卫生质量的污染指标更具有卫生学意义。;致病菌;食品中常见的致病性微生物;;;;致病性大肠杆菌;大肠杆菌O157;生物学特性;

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;致病物质;所致疾病;谢谢大家！