鱼类多倍体育种技术及应用.ppt

异源四倍体是可育的，而不加倍的（AB）可能是杂种不育。异源四倍体或是同源四倍体，也具有可育性）。（AA）（BB）（AABB）×（AAAA）×（BBBB）（AABB）异源多倍体：染色体组内容不相同，来自不同物种也称双二倍体。（AA）×（BB）（AB）+（AB）第30页，共82页，星期日，2025年，2月5日鱼类的远缘杂交可能产生单倍体、二倍体和多倍体(Chevassus1983)。用雌性草鱼(2n=48)与雄性三角鲂(2n=48)杂交，获得子一代染色体数目为72的草鲂杂种三倍体(刘思阳1987)。第31页，共82页，星期日，2025年，2月5日用异育银鲫与兴国红鲤杂交获得复合四倍体(种间杂交)，第二极体排放受到抑制从而产生多倍体，而种内杂交很少有不排出第二极体的,其机理尚需进一步探讨；第32页，共82页，星期日，2025年，2月5日核移植诱导鱼类多倍体技术仍处于实验阶段，用四倍体的草鱼培养细胞的细胞核作为供体移植到泥鳅的去核卵内，获得心跳期的四倍体胚胎，该技术的成熟很可能成为诱导四倍体鱼类的有效途径之一第33页，共82页，星期日，2025年，2月5日细胞融合主要诱导鱼类囊胚细胞与囊胚细胞、囊胚细胞与未受精卵、囊胚细胞与受精卵或者受精卵与受精卵之间的细胞融合，第34页，共82页，星期日，2025年，2月5日但由于细胞内染色体发生重排，实际得到是含各种不同数量染色体的鱼类细胞群。但利用这一技术可以探索改良品种的可能性。第35页，共82页，星期日，2025年，2月5日2.2物理学方法

主要包括温度休克法静水压法，高盐高碱法电休克法。第36页，共82页，星期日，2025年，2月5日物理学方法机制主要是通过破坏微管形成，使由微管蛋白聚合成的微管解体或阻止微管的聚合过程，使染色体失去移动的动力，人为抑制染色体向两极移动，形成多倍体细胞。第37页，共82页，星期日，2025年，2月5日2.2.1温度休克法即用略高于或略低于致死温度的冷或热休克来诱导三倍体(抑制第二极体排放)或四倍体(抑制第一次卵裂)的方法。根据处理温度的高低分为热休克法和冷休克法。一般冷水性鱼类如鲑科鱼类，通常用热休克，温度范围为28℃～36℃；第38页，共82页，星期日，2025年，2月5日温水性鱼类可以用热休克，也可用冷休克，温度范围为0℃~10℃左右。鲤鱼用热休克可以获得较高比例的三倍体，香鱼三倍体的诱导用冷、热休克均可获得令人满意的结果。第39页，共82页，星期日，2025年，2月5日进行温度处理最重要的是必须确定处理的开始时间持续时间以及温度高低鱼类温度休克敏感性的差异除了遗传背景外，还与卵子成熟度有关。第40页，共82页，星期日，2025年，2月5日美洲红点鲑卵受精后15min用28℃高水温热休克处理10min，可诱导出100%的三倍体，孵化率42%。日本山口县外海水产试验场在水温15℃条件处理牙鲆受精卵4min，诱导出100%的三倍体牙鲆。第41页，共82页，星期日，2025年，2月5日实例：日本学者1943年将受精后10分钟的鲤鱼卵用0.5－3℃处理10－30分钟可获得三倍体；英国专家1972年对鲽鱼与川鲽杂交的受精卵（受精后15分钟）用0℃进行休克3.5小时，获得100%的三倍体并养成了成鱼。第42页，共82页，星期日，2025年，2月5日美国Valenti(1975)对奥里亚罗非鱼的受精卵进行冷休克处理，获得三倍体鱼。方法是将正在排卵的雌鱼捕出进行人工挤卵，加入精液，受精后14分钟后在11℃水温下处理1小时，再转入32℃条件下孵化成鱼苗，多倍体获得率为75%。第43页，共82页，星期日，2025年，2月5日水生所将受精后3分钟的鲤鱼卵用0－1.5℃的水温处理30分钟获得20－25%的三倍体。草鱼与团头鲂杂种受精卵在有受精后5分钟在0－2℃下进行冷处理20分钟，获得57%的三倍体，还有14%的四倍体。第44页，共82页，星期日，2025年，2月5日如果从受精后44分钟开始处理，持续时间26－34分钟，四倍体获得率为30－40%。草鱼卵用相同的方法处理可获得30%左右的三倍体。第45页，共82页，星期日，2025年，2月5日2.2.2静水压法(637-650kg/cm2)

抑制第二极体的排出或者抑制第一次卵裂。该方法最佳条件易于掌握，处理程序易于标准化，对受精卵的损伤小，处理3~