林木干旱胁迫 NAC 靶基因验证酵母单杂交+双荧光素酶联合代码+结果试题库及答案.docVIP

林木干旱胁迫NAC靶基因验证酵母单杂交+双荧光素酶联合代码+结果试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.酵母单杂交技术主要用于研究（）

A.蛋白质相互作用B.DNA与蛋白质相互作用

C.基因表达调控D.细胞信号转导

2.双荧光素酶报告基因实验中，常用的内参基因是（）

A.GFPB.RlucC.LUCD.CAT

3.在林木干旱胁迫研究中，NAC基因主要参与（）

A.光合作用B.呼吸作用

C.逆境响应D.激素合成

4.构建酵母单杂交文库时，需要将（）片段连接到载体上。

A.启动子B.编码区C.内含子D.终止子

5.双荧光素酶检测时，检测的信号是（）

A.荧光强度B.吸光度C.发光强度D.电压值

6.酵母单杂交筛选到的阳性克隆，下一步通常进行（）

A.测序验证B.蛋白表达C.细胞培养D.基因敲除

7.干旱胁迫下，NAC基因表达量一般会（）

A.降低B.升高C.不变D.随机变化

8.双荧光素酶实验中，报告基因载体包含（）

A.启动子和报告基因B.增强子和报告基因

C.终止子和报告基因D.内含子和报告基因

9.酵母单杂交实验中，常用的筛选标记是（）

A.AmpB.KanC.HisD.Tet

10.验证NAC靶基因，酵母单杂交和双荧光素酶联合使用的目的是（）

A.提高实验效率B.降低实验成本

C.相互验证结果D.简化实验步骤

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.以下属于酵母单杂交实验步骤的有（）

A.构建诱饵载体B.构建文库载体

C.酵母转化D.筛选阳性克隆

2.双荧光素酶报告基因系统的优点包括（）

A.灵敏度高B.检测快速

C.可定量分析D.操作简单

3.在林木干旱胁迫研究中，NAC基因可能调控的途径有（）

A.渗透调节B.抗氧化防御

C.激素信号转导D.细胞壁合成

4.构建酵母单杂交文库的材料可以是（）

A.叶片B.根C.茎D.花

5.双荧光素酶实验中，影响实验结果的因素有（）

A.细胞转染效率B.培养条件

C.载体构建质量D.检测仪器

6.酵母单杂交筛选到的阳性克隆可能存在的问题有（）

A.假阳性B.假阴性

C.插入片段错误D.表达量低

7.干旱胁迫可能导致林木体内（）变化。

A.水分含量B.激素水平

C.基因表达D.代谢产物

8.双荧光素酶报告基因载体构建需要用到的工具酶有（）

A.限制性内切酶B.DNA连接酶

C.反转录酶D.聚合酶

9.酵母单杂交实验中，选择合适的酵母菌株需要考虑（）

A.营养缺陷型B.转化效率

C.生长特性D.遗传背景

10.验证NAC靶基因时，酵母单杂交和双荧光素酶联合实验设计应注意（）

A.实验重复次数B.对照组设置

C.样本量大小D.实验顺序

三、判断题（每题2分，共10题）

1.酵母单杂交只能用于研究植物基因。（）

2.双荧光素酶实验中，两种荧光素酶的发光原理相同。（）

3.NAC基因在所有林木中功能都一样。（）

4.构建酵母单杂交文库时，载体上不需要启动子。（）

5.双荧光素酶实验结果可以直接反映基因的表达水平。（）

6.酵母单杂交筛选到的阳性克隆一定是真正的相互作用蛋白。（）

7.干旱胁迫下，所有林木基因表达都会发生变化。（）

8.双荧光素酶报告基因载体构建成功后可直接用于实验，无需验证。（）

9.酵母单杂交实验中，营养缺陷型培养基用于筛选转化成功的酵母。（）

10.验证NAC靶基因，仅用酵母单杂交或双荧光素酶一种方法即可。（）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述酵母单杂交原理。

答案：将已知顺式作用元件构建到诱饵载体上，与酵母报告基因相连。文库蛋白与诱饵元件相互作用时，可激活报告基因表达，通过筛选报告基因，找到与顺式元件相互作用的蛋白对应的基因。

2.双荧光素酶报告基因实验如何设置对照组？

答案：设置空载对照组，即转染不含目的基因的载体；设置阴性对照组，转染不与目的基因相互作用的载体；设置阳性对照组，转染已知能产生明显荧光变化的载体，用于对比和验证实验可靠性。

3.说明林木干旱胁迫下NAC基因研究的意义。

答案：有助于了解林木在干旱环境下的适应机制，通过解析NAC基