药学实验技术在药物细胞学中的应用.pptxVIP

药学实验技术在药物细胞学中的应用本演示将探讨药物与细胞相互作用检测的关键技术和方法。我们将深入了解实验技术在药物研发过程中的重要性。同时，关注该领域的最新技术进展与多样化应用场景。汇报人：墨卷生香

内容概述药物细胞学基础掌握药物与细胞相互作用的基本原理细胞培养与检测技术了解细胞培养和药物-靶点相互作用检测的关键方法细胞功能学评价掌握药物对细胞摄取和功能影响的评估方法新兴技术与未来发展探索前沿技术在药物细胞学中的应用前景

药物细胞学简介学科定位专注研究药物与细胞之间的相互作用机制与效应研发支撑为药物研发全过程提供基础性实验数据与理论依据研究范围涵盖靶点识别、药物筛选、作用机制及毒性评估等环节

药物研发中的细胞学方法意义降低临床失败风险提前预测可能的毒副作用阐明作用机制明确药物在细胞水平的作用靶点与途径加速化合物筛选快速识别和优化潜在先导化合物安全性有效性评估建立细胞水平的综合评价体系

细胞培养技术基础二维培养系统细胞在平面表面生长操作简便，成本低细胞形态单一，缺乏空间结构三维培养系统细胞在三维环境中生长更接近体内微环境细胞间相互作用更真实常用培养基RPMI1640：适用于淋巴细胞MEM：适用于早期培养研究DMEM：高营养，广泛应用HamsF12：适合低血清培养

细胞培养技术在药物研发中的应用靶点鉴定流程简化通过基因编辑细胞模型验证靶点功能构建表达特定靶点的稳定细胞系实现高效靶点药物初步筛选早期毒性评估肝细胞毒性预测心肌细胞功能影响评估肾小管细胞损伤检测生理环境模拟三维细胞培养模拟组织微环境共培养系统重现细胞间相互作用器官芯片技术模拟组织功能单元

药物靶点相互作用检测技术原理生物发光共振能量转移基础BRET技术利用能量从供体分子传递到受体分子的物理现象。转移效率取决于分子间距离，提供精确的相互作用信息。NanoBRET?技术优化采用纳米荧光素酶作为能量供体，显著提高信号强度。特异性荧光团作为能量受体，减少背景干扰。实时检测实现荧光素酶标记靶蛋白，荧光团标记药物。相互作用发生时产生可定量的能量转移信号。

NanoBRET?TE检测系统活细胞亲和力检测在生理条件下测定药物与靶蛋白结合强度药物透膜性评估分析药物穿越细胞膜到达胞内靶点的能力滞留时间测定监测药物与靶点的解离动力学参数多靶点适用性适用于激酶、GPCR、核受体等多种靶点类型

NanoBRET?技术应用优势活细胞实时监测保持完整生理环境下的检测定量分析结合动力学获取结合亲和力和动力学参数高灵敏度和特异性检测微弱相互作用，减少假阳性

NanoBRET?技术应用案例NanoBRET?技术已成功应用于多种药物靶点研究。热休克蛋白药物筛选显示高度特异性。激酶抑制剂评价可获得精确结合参数。不同细胞类型中的活性差异比较揭示了药物选择性。

细胞摄取实验概述药物吸收研究评估药物通过细胞膜的能力转运机制分析识别主动或被动转运途径药物代谢研究细胞内药物转化与积累结构优化依据为药物分子设计提供实验基础4

细胞摄取实验方法学荧光标记法利用荧光团标记药物分子，通过荧光显微镜或流式细胞仪追踪药物进入细胞过程。同位素标记法采用放射性同位素标记药物，通过放射性计数直接量化细胞摄取药物量。质谱分析法利用液相色谱-质谱联用技术，精确测定细胞内药物及其代谢产物的浓度。

细胞摄取实验在药物研发中的应用应用领域研究内容技术方法吸收机制主动或被动转运方式温度依赖性实验转运蛋白研究药物-转运蛋白相互作用抑制剂竞争实验细胞内分布药物在细胞内的定位共聚焦显微成像动力学研究药物进入细胞的速率实时监测技术

细胞功能学检测方法概述细胞活力检测评估细胞生存状态与数量细胞凋亡检测分析程序性细胞死亡进程代谢活性测定检测细胞能量代谢变化信号通路分析评价药物对细胞信号传导的影响

CellTiter-Glo?发光活细胞检测系统1ATP含量检测原理基于荧光素酶催化反应，ATP含量与发光信号成正比2高灵敏度优势检测限低至10个细胞，信号持续时间长达6小时3广泛兼容性与多种培养基兼容，不受酚红和常见有机溶剂影响4操作便捷性一步法操作，减少实验误差，适合高通量筛选

CellTiter-Glo?检测优势灵敏度评分操作便捷性信号稳定性

细胞毒性试验技术LDH释放检测法测定细胞损伤释放的乳酸脱氢酶，快速评估膜损伤程度。膜完整性评估通过特殊染料标记，区分完整细胞和受损细胞，定量毒性水平。形态学观察直接观察药物处理后细胞形态变化，评估毒性效应特征。

细胞功能学实验步骤细胞收集与准备消化、计数、调整细胞浓度细胞铺板与处理接种适量细胞，培养至适当密度药物处理与培养添加不同浓度药物，设置对照组数据采集与分析加入检测试剂，采集数据并分析结果

细胞增殖实验应用对照组低剂量组高剂量组

高通量筛选技术自动化细胞培养系统机械臂自动操作标准化培养条件控制减少人为误差多参数高内