病毒培养技术讲解.pptxVIP

动物微生物应用技术

教师：刘莎莎

任务二：病毒的培养技术

一、病毒增殖

以自身基因组为模板，借助宿主细胞的酶类，复制出病毒的基因组，病毒的基因组经过编码产生大量的病毒蛋白质，经过装配，形成子代病毒。

复制周期：吸附、穿入、脱壳、生物合成、装配与释放。

病毒本身没有独立的蛋白合成酶系统，必须借助宿主细胞的蛋白合成体系合成病毒蛋白。

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病毒的增殖过程

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一、病毒增殖

吸附——病毒与细胞接触，依赖病毒吸附点，通过包膜表面或表面的配体蛋白与相应的受体结合；

穿入——融合（有包膜）、吞饮（无包膜）、直接穿入；

脱壳——宿主细胞溶酶体作用下，衣壳破裂、释放核酸；

生物合成——随核酸类型而异(复制、转录、翻译)；

装配——子代病毒核酸和结构蛋白组装成病毒核衣壳。核内装配、核外装配；

释放——离开宿主细胞，出芽、挤破、细胞分裂。

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一、病毒增殖

脊椎动物

病毒繁殖

1.吸附:病毒通过刺突与细胞受体特异结合吸附到寄主细胞上

2.侵入:病毒被吞噬到囊泡中,囊膜破裂,病毒核酸被释放到细胞质。

3.脱壳和生物合成:在病毒基因控制下,细胞合成新病毒的基本成分，核酸、衣壳粒蛋白和刺突蛋白。

4.成熟装配:刺突蛋白整合到形成病毒囊膜的细胞膜中,核酸和衣壳粒蛋白装配成核衣壳。

5.释放:有囊膜病毒以出芽方式离开细胞膜,携带着含刺突的囊膜。成熟的病毒粒子具侵染性。

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动物接种

病毒通过注射、口服等途径进入易感动物体内并大量繁殖，使动物产生特定反应。

要求：被接种的实验动物健康。血清中无相应的病毒抗体。

用途：病原学检查、传染病的诊断、抗血清制造及疫苗效力检验。

缺点：实验动物难于管理、成本高、个体差异大。

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二、病毒人工培养

鸡胚培养法

病毒接种于鸡胚后，观察病毒的增值情况，可根据鸡胚的病变和病毒抗原检测等方法进行判断。

要求：鸡胚健康、不含特异性病毒抗体、SPF鸡胚。

接种途径：绒毛尿囊膜、羊膜腔、尿囊腔、卵黄囊等

用途：病毒的分离、鉴定、病毒复制、制备抗原和疫苗。

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二、病毒人工培养

细胞培养法

在体外利用离体的活细胞进行病毒培养的方法。能导致细胞病变（变形）或者出现血细胞吸附和血凝现象。

细胞：原代细胞、二倍体细胞株、传代细胞。

用途：病毒的分离、增值，病毒抗原疫苗制备，中和试验、病毒空斑测定、克隆纯化等。

优点：离体活细胞不容易受机体免疫力影响，病毒易于生长；可人工选择多种敏感细胞供病毒生长，病毒产量高；易于观察病毒的生长特征；便于收集病毒做进一步检查。

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二、病毒人工培养

本次课

就到这里了！

再见！

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