病毒中和试验方法.pdfVIP

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固定血清稀释病毒法

用中和试验方法鉴定病毒时,将不同稀释倍数

的病毒与标准的抗血清(20个抗体单位/单位体积)混

合、孵育,使二者充分反应,然后将混合液接种到

敏感宿主体内,观察试验结果。

固定血清稀释病毒法

试验材料

⚫宿主:敏感细胞和动物、鸡胚

⚫标准抗病毒血清(20个抗体单位/0.1ml)

⚫病毒分离物

试验步骤

⚫不同浓度病毒液与等量的抗病毒血清混合细胞培养液倍比稀

释病毒

⚫不同浓度病毒液与等量阴性血清混合

⚫接种细胞,设正常细胞对照,CO孵箱观察CPE

2

中和试验病毒CCID当抗血清组的CCID与阴性组之差

50:50

的对数大于2,才说明中和试验阳性。

固定血清稀释病毒法

阴性血清病毒CCID50的计算

病毒CPE孔数/累计数CPE阳性CPE阳性率

稀释度接种孔数CPE数存活数比例(%)

10-45/510010/10100.0

10-54/5515/683.0

10-61/5151/617.0

10-70/50100/100

固定血清稀释病毒法

距离比例=(大于50%的CPE阳性率—50%)/(大于

50%的CPE阳性率-小于50%的CPE阳性率)=(83-50)

/(83-17)=0.5

lgCCID=大于50%的CPE阳性率血清稀释度的对数+距

50

-5

离比例×稀释系数的对数=lg10+0.5×lg0.1=-5.5,

其反对数是10-5.5.

阴性血清组的病毒CCID为10-5.5/0.1ml。

50

固定血清稀释病毒法

阳性血清病毒CCID50的计算

病毒CPE孔数/累计数CPE阳性CPE阳性率

稀释度接种孔数CPE数存活数比例(%)

10-25/510010/10100.0

10-33/5525/771.0

10-42/5252/729.0

10-50/50100/100

固定血清稀释病毒法

距离比例=(大于50%的CPE阳性率—50%)/(大于50%的CPE

阳性率-小于50%的CPE阳性率)

=(71-50)/(71-29)=0.5

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