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探秘ILT基因修饰树突状细胞：开启移植物免疫耐受的新钥匙

一、引言

1.1研究背景

器官移植作为治疗多种终末期疾病的有效手段，为众多患者带来了生存的希望。随着医学技术的飞速发展，器官移植的成功率和患者的生存率都得到了显著提高。以肝移植为例，中山大学附属第一医院运用“无缺血”器官移植技术后，肝移植一年生存率从大概90%提升到了99.8%，术后患者并发症明显下降，康复时间缩短，生活质量得到明显提升。然而，移植物免疫排斥反应仍然是阻碍移植器官长期存活和影响患者生活质量的关键因素。在临床实践中，尽管使用免疫抑制剂能够在一定程度上控制排斥反应，但长期使用免疫抑制剂不仅会导致患者免疫力下降，增加感染和肿瘤的发生风险，还可能引发肝肾毒性等诸多并发症，给患者带来沉重的负担。

因此，诱导移植物免疫耐受成为了移植医学领域的研究热点。免疫耐受是指机体免疫系统对特定抗原的特异性无反应状态，在器官移植中，诱导免疫耐受可以使受者免疫系统对移植器官不产生排斥反应，从而实现移植器官的长期存活，同时减少免疫抑制剂的使用及其带来的副作用。

树突状细胞（DendriticCell，DC）作为体内最重要的抗原递呈细胞，在免疫系统中发挥着关键作用。DC的免疫学功能具有两重性，在不同条件下，既能够活化T淋巴细胞，产生免疫应答，也可以使T细胞产生耐受，介导免疫耐受。研究发现，免疫球蛋白样转录物（Immunoglobulin-likeTranscript，ILT）3和ILT4是表达于DC表面的抑制性受体，对于耐受性DC的形成起着非常重要的作用。维生素D3或细胞因子（如IL-10，IFN-α等）能诱导未成熟DC转化为耐受性DC，其中IL-10还可使ILT4表达增高，同时下调共刺激信号分子CD86等的表达。这些研究结果表明，ILT3、ILT4表达增加可能是耐受性DC的共同特征，高表达或强制性表达的ILT3、ILT4可诱导DC耐受，进而使机体产生免疫耐受。基于此，通过对DC进行ILT基因修饰，有望诱导移植物免疫耐受，为解决器官移植排斥问题提供新的途径。

1.2研究目的与意义

本研究旨在通过将ILT基因修饰的树突状细胞应用于移植物免疫耐受的研究，探索一种新的诱导免疫耐受的方法，并深入探究其作用机制。具体而言，本研究的目的包括以下两个方面：一是利用基因工程手段将ILT基因高效导入树突状细胞中，观察其在体内外是否能够调节特异性免疫应答，从而诱导移植物免疫耐受；二是通过分子生物学技术和免疫学技术，深入研究ILT基因修饰的树突状细胞诱导免疫耐受的分子机制。

本研究具有重要的理论意义和临床应用价值。从理论意义上讲，深入探究ILT基因修饰的树突状细胞诱导免疫耐受的机制，有助于进一步揭示免疫系统的调节机制，丰富免疫学理论，为免疫相关疾病的研究提供新的思路和理论基础。从临床应用价值来看，若能够成功诱导移植物免疫耐受，将为器官移植患者带来福音。这不仅可以提高移植器官的存活率，减少移植后的排斥反应，还能够降低免疫抑制剂的使用剂量和相关并发症的发生，提高患者的生活质量，减轻患者的经济负担，具有显著的社会效益和经济效益。

1.3国内外研究现状

在国外，对树突状细胞和免疫耐受的研究开展较早，取得了一系列重要成果。有研究应用腺病毒或逆转录病毒为载体，将具有诱导耐受作用的免疫抑制分子靶基因转染给供体DC并使其表达，实验证实单独转导这些靶基因可降低移植物排斥机率，延长器官植活时间。对于ILT基因与树突状细胞的关系，国外研究发现维生素D3或细胞因子（如IL-10，IFN-α等）能诱导未成熟DC转化为耐受性DC，且IL-10可使ILT4表达增高，同时下调共刺激信号分子CD86等的表达，表明ILT3、ILT4表达增加与耐受性DC的形成密切相关。

在国内，相关研究也在积极开展。有学者从大鼠骨髓中分离并诱导扩增DC进行功能鉴定，将重组腺病毒载体构建ILT转染DC并检测转染后DC生物学特性，发现基因转染后RT-PCR检测高表达ILT，且用流式细胞术分析基因转染前后DC细胞表面的CD80、CD86、MHC-Ⅱ等表型没有明显改变，说明ILT基因转染后没有改变DC原有的活性和基本功能。通过MTT法检测异基因混合淋巴细胞增殖情况以及用AnnexinV/PI双检法检测T细胞凋亡情况，证实了ILT-DC可通过使T细胞低反应性和细胞凋亡在移植中诱导一定程度的免疫耐受。

然而，当前研究仍存在一些不足之处。一方面，虽然已经明确了ILT基因修饰的树突状细胞在诱导免疫耐受方面具有一定作用，但对于