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基于适配体技术的止咳平喘中成药中非法添加沙丁胺醇快速检测体系构建与应用

一、引言

1.1研究背景与意义

止咳平喘类中成药在我国药品市场中占据着重要地位，是呼吸系统疾病治疗的常用药物。随着人们健康意识的提高以及对中医药的认可，其市场需求持续增长。据相关数据显示，2024年中国止咳祛痰平喘中成药市场规模突破300亿元，零售药店终端首次占比超49%成为主渠道。此类药物多由多种中药材配伍而成，通过调理机体气血、阴阳平衡，达到止咳平喘的功效，具有副作用小、标本兼治等优点，深受消费者青睐。

然而，一些不法商家为了追求快速疗效和经济利益，在止咳平喘中成药中非法添加化学药物沙丁胺醇。沙丁胺醇作为一种β2受体激动剂，虽能迅速缓解支气管痉挛，改善哮喘症状，但其本身存在诸多副作用，如长期或过量服用，会导致心悸、震颤、头痛、心律失常等不良反应，严重损害消费者的身体健康。这种非法添加行为不仅破坏了中成药的安全性和有效性，也扰乱了市场秩序，违背了中医药的传统理念和价值观，对中医药行业的声誉造成了负面影响。

当前，针对中成药中非法添加沙丁胺醇的检测方法，如色谱法、光谱法等，虽具有较高的灵敏度和准确性，但存在依赖昂贵仪器、操作复杂、检测时间长等问题，难以满足现场快速检测和大量样本筛查的需求。免疫检测法虽相对简便，但抗体的制备困难、成本高且批间差异大。因此，开发一种快速、准确、简便且成本低廉的检测方法迫在眉睫。适配体技术的出现为解决这一问题提供了新的思路。适配体具有高特异性、高亲和力、易于合成和修饰等优点，基于适配体构建的检测方法能够实现对沙丁胺醇的快速、灵敏检测，对于保障中成药质量安全、维护消费者权益以及规范市场秩序具有重要的现实意义。

1.2沙丁胺醇与止咳平喘中成药概述

沙丁胺醇（Salbutamol），化学名为1-(4-羟基-3-羟甲基苯基)-2-(叔丁氨基)乙醇，是一种选择性β2肾上腺素受体激动剂。其主要药理作用是通过激动气道平滑肌上的β2受体，激活腺苷酸环化酶，使细胞内的环磷腺苷（cAMP）含量增加，从而松弛支气管平滑肌，缓解支气管痉挛，达到平喘的效果。此外，沙丁胺醇还能抑制肥大细胞等致敏细胞释放过敏反应介质，如组胺、白三烯等，进一步减轻气道炎症和过敏反应。在临床上，沙丁胺醇常用于治疗支气管哮喘、喘息型支气管炎、伴有支气管痉挛的肺部疾病等，剂型包括气雾剂、片剂、注射剂等，能快速缓解患者的喘息症状，改善呼吸功能。

止咳平喘中成药是以中医理论为指导，由多种中药材按照一定的配方和工艺制成的复方制剂，用于治疗咳嗽、气喘等呼吸系统疾病。其作用机制较为复杂，往往通过多成分、多靶点协同作用来实现止咳平喘的功效。例如，一些中成药中的麻黄、杏仁等成分，麻黄中的麻黄碱可直接兴奋肾上腺素受体，松弛支气管平滑肌，杏仁中的苦杏仁苷在体内分解产生氢氰酸，对呼吸中枢有一定的抑制作用，从而镇咳平喘；同时，中成药还注重调理机体的整体功能，增强机体免疫力，达到标本兼治的目的。然而，由于中成药的成分复杂，质量控制难度较大，给非法添加化学药物提供了可乘之机。目前，市场上止咳平喘中成药非法添加沙丁胺醇的现象时有发生，严重威胁消费者的健康。相关监管部门虽加大了监管力度，但非法添加行为仍屡禁不止，检测技术的不完善使得部分违法产品难以被及时发现和查处。

1.3适配体技术简介

1.3.1适配体的概念与特性

适配体（Aptamer）是一类通过指数富集的配体系统进化技术（SELEX），从随机单链寡核苷酸文库（DNA或RNA）中筛选得到的寡核苷酸序列。这些序列能够折叠形成特定的三维空间结构，与靶分子（如蛋白质、小分子、细胞、病毒等）发生高特异性、高亲和力的相互作用，其解离常数（Kd）可低至pmol/L-nmol/L水平。适配体的筛选过程通常包括以下步骤：首先，构建一个含有10^14-10^15种不同序列的单链寡核苷酸文库；然后，将文库与靶分子孵育，使适配体与靶分子特异性结合；接着，通过分离技术（如磁珠分离、亲和层析等）将结合了靶分子的适配体与未结合的寡核苷酸分离；再通过聚合酶链式反应（PCR）对结合的适配体进行扩增，得到富集了与靶分子结合的适配体文库；经过多轮筛选和扩增，最终获得对靶分子具有高亲和力和特异性的适配体。

适配体具有诸多优异特性。其一，高特异性和高亲和力，能与靶分子精准结合，区分结构相似的分子，这使得基于适配体的检测方法具有良好的选择性和灵敏度；其二，易于化学合成和修饰，可在适配体的末端或内部引入各种功能基团，如荧光基团、生物素、巯基等，便于与其他物质连接或进行信号检测；其三，稳定性较好，相较于蛋白质抗体，适配体对温度、pH值等环境因素的耐受性更强，在不同的储存和使用条件下能保持其活性和结构完整性；其四，适配体的分子量较小