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2025年生物制药秋招真题及答案

一、单项选择题（每题2分，共30分）

1.在CHO细胞中实现高表达时，下列哪种启动子组合在双顺反子系统中对轻链与重链的均衡表达最有效？

A.CMV-MIE+EF1α

B.EF1α+SV40

C.CAG+hPGK

D.UBC+TK

答案：A

解析：CMV-MIE提供高强度瞬时表达，EF1α维持长期稳定，两者组合可在加压扩增阶段保持轻链/重链摩尔比接近1:1，减少ERstress。

2.某单抗在pH3.5条件下孵育4h后SEC-HPLC聚体由1.2%升至8.7%，若将缓冲液改为pH3.5+200mM精氨酸-HCl，聚体降至2.1%，其稳定机制主要是：

A.精氨酸提供碱性环境提高抗体pI

B.精氨酸屏蔽蛋白表面疏水补丁并抑制静电排斥

C.精氨酸作为还原剂阻止二硫键交换

D.精氨酸增加溶液离子强度导致蛋白盐析

答案：B

解析：精氨酸胍基与芳香族侧链形成阳离子-π相互作用，遮蔽疏水区域，同时降低蛋白-蛋白碰撞频率。

3.采用CRISPR-Cas9敲除GS基因以构建谷氨酰胺合成酶缺陷型CHO时，若单克隆测序出现“-1bp”与“+2bp”两种indel比例分别为67%与33%，则该位点的切割效率最接近：

A.67%

B.82%

C.95%

D.100%

答案：C

解析：出现两种indel提示双等位基因均被编辑，且未检测到WT序列，切割效率≈1-(1-0.67-0.33)2=95%。

4.在2L生物反应器中，某Fed-batch工艺第6天检测到乳酸8g/L，若立即将培养温度由37°C降至32°C，可观察到的最直接代谢变化是：

A.糖酵解通量上升，乳酸继续升高

B.TCA通量下降，ATP生成减少

C.谷氨酰胺消耗速率加快

D.比生产率qP显著下降

答案：B

解析：低温抑制糖酵解关键酶活性，降低丙酮酸通量，乳酸生成减少；同时TCA循环酶活性下降，ATP产率降低。

5.下列哪项不是双特异性抗体“Knobs-into-Holes”技术的潜在缺陷？

A.重链错配率仍可达5-15%

B.需要额外引入二硫键稳定

C.轻链与错误重链配对

D.增加下游ProteinA纯化难度

答案：D

解析：KiH结构仍保留Fc区，对ProteinA亲和力无显著影响；主要难点在于重链错配与轻链错配。

6.对于ADC药物，若采用vc-MMAE连接子-毒素，下列哪种检测方法可最直接反映血浆中“releasedtoxin”水平？

A.抗MMAEELISA

B.LC-MS/MS测定游离MMAE

C.细胞毒性生物测定

D.SEC-HPLC

答案：B

解析：LC-MS/MS可直接定量游离MMAE，避免抗体交叉反应干扰。

7.在IND申报中，关于“病毒清除验证”，下列哪项描述符合ICHQ5A(R1)？

A.至少两步机理互补的清除步骤，累计降低≥6log10

B.至少一步物理去除+一步灭活，累计降低≥12log10

C.必须使用actualspikingvirus，不可采用模型病毒

D.缩小模型规模可接受下限为1%原体积

答案：A

解析：ICHQ5A要求两步及以上机理互补步骤，累计清除≥6log10；可使用代表模型病毒。

8.某单抗制剂中加入0.01%聚山梨酯80（PS80），加速40°C4周后可见颗粒数上升，若将PS80更换为0.01%聚山梨酯20（PS20），颗粒减少，其最可能机制是：

A.PS20碳链更长，临界胶束浓度更低

B.PS20不含有不饱和双键，氧化稳定性高

C.PS20亲水亲油平衡值HLB更低

D.PS20为离子型表面活性剂

答案：B

解析：PS80含油酸侧链易氧化生成醛酮，诱导蛋白聚集；PS20为饱和烷链，氧化敏感性低。

9.在采用ExpiCHO表达系统快速制备候选抗体时，若转染后18h添加10μM丁酸钠，其目的主要是：

A.抑制细胞凋亡

B.增强组蛋白乙酰化，开放染色质

C.提高谷氨酰胺代谢

D.降低培养渗透压

答案：B

解析：丁酸钠为HDAC抑制剂，增加组蛋白乙酰化水平，促进外源基因转录。

10.关于高浓度抗体制剂（150mg/mL）的粘度，下列哪种辅料降粘效率排序正确？

A.精氨酸-HCl盐酸组氨酸氯化钠

B.氯化钠盐酸组氨酸精氨酸-HCl

C.盐酸组氨酸精氨酸-HCl氯化钠