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2025年化学发光免疫分析考核试题及答案
1.(单选)在吖啶酯直接化学发光体系中,触发发光的最常用碱性试剂组合是
A.NaOH-H?O??B.KOH-NaClO?C.Tris-HCl?D.HEPES-Mg2?
答案:A
解析:吖啶酯在碱性H?O?条件下发生瞬时电子转移,激发态N-甲基吖啶酮释放428nm光子,NaOH提供OH?,H?O?提供活性氧,二者协同效率最高。
2.(单选)磁微粒化学发光免疫分析(CMIA)中,用于封闭磁珠表面未结合位点的最佳封闭剂是
A.脱脂奶粉?B.卵清蛋白?C.酪蛋白酸钠?D.PEG2000
答案:C
解析:酪蛋白酸钠分子量适中,疏水区可覆盖疏水微球,亲水区带负电,降低非特异吸附,且不与常见抗体发生交叉反应。
3.(单选)下列关于ALP-AMPPD体系的叙述,错误的是
A.发光信号呈“闪光型”?B.可检测10?21mol级抗原?C.需Mg2?作为辅因子?D.背景发光主要源于AMPPD自水解
答案:A
解析:ALP催化AMPPD去磷酸化生成不稳定二氧杂环丁烷,分解过程持续数分钟,属“辉光型”信号,而非闪光。
4.(单选)竞争法测小分子激素时,若标记抗原发光效率下降10%,则校准曲线将
A.斜率增大,截距不变?B.斜率减小,截距增大?C.斜率减小,截距减小?D.斜率不变,截距增大
答案:B
解析:发光效率降低使信号窗口缩小,斜率下降;零浓度点信号升高,截距增大,表现为曲线整体右移且变平缓。
5.(单选)化学发光酶免疫分析(CLEIA)中,辣根过氧化物酶(HRP)催化鲁米诺发光的最佳pH为
A.5.0?B.7.4?C.8.6?D.9.8
答案:C
解析:pH8.6时鲁米诺去质子化与HRP-CompoundⅢ形成速率匹配,量子产额最大,pH9.5后酶活性下降。
6.(单选)全自动化学发光仪采用“两步法”清洗的目的是
A.降低携带污染?B.缩短反应时间?C.提高标记物稳定性?D.减少底物消耗
答案:A
解析:两步法先用酸性洗液解离弱结合物,再用中性缓冲液平衡,可将携带污染率从5ppm降至0.1ppm以下。
7.(单选)在双抗体夹心法中,若包被抗体与标记抗体识别同一抗原的不同表位,且空间位阻严重,则会出现
A.高剂量钩状效应前移?B.低剂量信号抬高?C.校准曲线平台期消失?D.灵敏度提高
答案:A
解析:空间位阻导致高浓度时抗原“桥联”失败,信号提前下降,钩状效应向低浓度区移动。
8.(单选)化学发光共振能量转移(CRET)体系中,供体与受体的最佳距离为
A.1–3nm?B.5–10nm?C.15–20nm?D.30nm
答案:B
解析:CRET效率与距离六次方成反比,5–10nm时能量转移效率50%左右,可构建均相灵敏检测。
9.(单选)关于电化学发光(ECL)三联吡啶钌标记物,下列说法正确的是
A.需溶解氧作为共反应剂?B.发光波长随电极材料变化?C.可反复氧化还原循环发光?D.标记过程需戊二醛活化
答案:C
解析:Ru(bpy)?2?在TPA作用下可多次氧化还原,每次循环均发光,实现信号放大;无需耗氧,波长固定620nm。
10.(单选)室内质控图采用Westgard多规则,下列哪一组规则主要检测系统误差
A.1?s?B.2?s?C.R?s?D.10x
答案:D
解析:10x规则指连续10次结果偏向均值同一侧,对漂移敏感,属系统误差标志;1?s、R?s主要检随机误差。
11.(单选)化学发光试剂盒加速稳定性试验常用温度是
A.25℃?B.37℃?C.45℃?D.60℃
答案:C
解析:45℃加速降解速率约为4℃的8–10倍,可在4周内模拟2–8℃保存18个月,且避免60℃导致蛋白变性失真。
12.(单选)下列哪种干扰物最可能使促甲状腺激素(TSH)测定出现假低值
A.生物素30ng/mL?B.人抗鼠抗体(HAMA)?C.异嗜性抗体?D.类风湿因子
答案:A
解析:高浓度生物素与链霉亲和素竞争结合,阻断信号级联,导致信号降低,TSH假低值;其余多为假高值。
13.(单选)磁微粒表面羧基化后,与抗体偶联最常用的缩合剂是
A.EDC/NHS?B.CNBr?C.戊二醛?D.过碘酸钠
答案:A
解析:EDC活化羧基生成不稳定O-酰基异脲,NHS形成稳定活性酯,与抗体氨基高效偶联,副反应少。
14.(单选)化学发光仪光电倍增管(PMT)增益漂移±5%,对下列哪项指标影响最大
A.精密度?B.准确度?C.线性范围
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