化学键合相色法.pptVIP

中国药科大学药物色谱分析课程药物色谱分析中国药科大学药物色谱分析课程化学键合相色法第1页，共36页，星期日，2025年，2月5日1、化学键合相色谱的定义化学键合相色谱借助于化学反应的方法将有机分子以共价键连接在色谱担体上形成化学键合相，以化学键合相为固定相的色谱法称为化学键合相色谱（bondedphasechromatography，BPC），简称键合相色谱。第2页，共36页，星期日，2025年，2月5日2、化学键合相的特点与液－液分配色谱相比，使用过程中固定相不流失，耐溶剂冲洗。与液－固吸附色谱相比，消除了担体上的表面活性作用点，清除了某些可能的催化活性。表面改性灵活，容易获得重复性产品。化学性能稳定，耐受范围为pH2～8。热稳定性好，一般在70℃以下稳定。载样量大，比硅胶约高一个数量级。梯度洗脱平衡快。第3页，共36页，星期日，2025年，2月5日3、化学键合相的稳定性1．在较低pH值条件下（pH2） 键合相中Si―O―Si键易受Lewis酸等亲电试剂的进攻而断裂：2．化学键合固定相在较高pH值条件下的稳定性（pH9）键合相中Si―O―Si键很容易被KOH和NaOH这一类强碱性亲核试剂所切断：第4页，共36页，星期日，2025年，2月5日4、化学键合相的分类化学键合相的分类可以有不同的依据。 按键合相的表面结构：单分子键合和聚合键合； 按键合有机硅烷的官能团：极性键合相、非极性键和相和离子交换键合相三种。第5页，共36页，星期日，2025年，2月5日二、制备与评价1、化学键合相的制备2、常见的官能团3、常用的键合相商品牌号4、化学键合相性能评价第6页，共36页，星期日，2025年，2月5日1、化学键合相的制备要形成化学键合固定相，有两个必要条件：所用的担体材料应有某种化学反应活性，如硅胶、氧化铝、硅藻土等表面都具有化学反应的官能团，一般以硅胶最为理想的和常用。有机分子应含有能与担体表面发生反应的官能团。第7页，共36页，星期日，2025年，2月5日1、化学键合相的制备硅胶预处理溶剂与试剂预处理衍生化反应端基封尾第8页，共36页，星期日，2025年，2月5日(1)硅胶的预处理在制备键合相时，首先作为担体的硅胶需要酸处理，洗去制备、运输和保存过程中引入的污染物；除去表面层的金属氧化物杂质，如Na+、Ca2+、Al3+、Fe3+等；使表面的硅氧烷键打开，形成尽可能多的自由羟基，有利于反应。第9页，共36页，星期日，2025年，2月5日(1)硅胶的预处理酸处理酸处理可以用0.1mol/L的盐酸，于90℃下浸泡24h，或以10%的盐酸在回流状态处理8h。中和中和，水洗至无Cl-，经酸处理后的硅胶表面的羟基浓度已达到理论值8μmol/m2左右。干燥在200℃以下真空烘干除去物理吸附水，注意不得超过200℃，否则硅醇基脱水形成硅氧烷结构。第10页，共36页，星期日，2025年，2月5日（2）溶剂与试剂预处理硅烷化试剂对水很敏感，使用前应以蒸馏方式进行纯化或以玻璃棉将其中的悬浮物滤去。所使用的有机溶剂，必须进行干燥。第11页，共36页，星期日，2025年，2月5日（3）衍生化反应（1）Si－O－C键型（2）Si－N或Si－C键型（3）Si－O－Si－C键型第12页，共36页，星期日，2025年，2月5日③Si－O－Si－C键型Si－O－Si－C键型是一类目前占绝对优势的键合相类型，具有良好的热稳定性及化学稳定性，能在pH2～8的介质中使用。这类键合固定相是硅胶上的硅羟基与有机氯硅烷或有机氧硅烷试剂反应而得。第13页，共36页，星期日，2025年，2月5日单官能团有机硅烷X通常为－Cl、－OH、－OCH3、－OC2H5等官能团；R通常为直链或支链烷基、芳香基，如－CH3、－C4H9、－C8H17、－C18H37、苯基等，也可以是它们被不同的基团取代后的衍生基团，如－(CH2)2CN、－(CH2)2NH2、－(CH2)n－O－CH2－OH等。第14页，共36页，星期日，2025年，2月5日双官能团有机硅烷双官能团化合物如R2SiX2可单独形成线型或环状有机硅氧烷。第15页，共36页，星期日，2025年，2月5日三官能团有机硅烷 硅烷化试剂中三个X基团都参与硅醇基反应的可能性很小。三官能团化合物如RSiX3反应后的产物可水解进一步形成硅羟基，进而形成三维交联化合物第16页，共36页，星期日，2025年，2月5日硅烷化试剂的反应活性为：RSiX3＞R2SiX2＞R3SiX。Si-O-Si-C：不水解，热