菊花的组织培养 (2).pptVIP

第1页，共14页，星期日，2025年，2月5日阅读课题背景,总结:什么是植物组织培养?思考：一、基础知识1、细胞分化（1）概念：在生物个体发育过程中，细胞在形态、结构、功能上产生稳定性差异的过程。（2）特点：持久性：发生在整个生活活动过程中，胚胎期分化程度达到最大。不可逆性：稳定性：分化过程，遗传物质是不变的，稳定的。（3）原因：基因选择性表达的结果（4）结果：产生不同的组织和器官第2页，共14页，星期日，2025年，2月5日2、植物细胞的全能性（1）概念：高度分化的植物细胞，仍具有发育成完整植株的潜能。（2）特点：受精卵＞生殖细胞＞体细胞体细胞中：分生区细胞＞成熟区细胞高度分化的动物体细胞全能性受到限制，但体细胞核仍具有全能性。（3）原因：体细胞都是通过有丝分裂由同一个受精卵增殖形成的，遗传物质（染色体）相同，携带有本物种的全部遗传信息。（４）表达的条件：离体、在一定的营养物质、激素和其它外界条件(适宜的温度、PH值、光照等)才能表达。第3页，共14页，星期日，2025年，2月5日3、植物组织培养（1）概念：是指离体的植物器官、组织或细胞，在无菌条件下，通过脱分化和再分化形成完成植株的过程。（2）过程：人工种子植株外植体愈伤组织胚状体脱分化再分化加上人工种皮①外植体：离体的植物器官、组织或细胞②脱分化：由高度分化的植物组织或细胞，恢复分裂增生能力，产生愈伤组织的过程③愈伤组织：外植体在培养过程中，通过细胞分裂所产生的、排列疏松不规则、高度液泡化的薄壁细胞群④再分化：愈伤组织通过细胞分裂、分化（表达全能性）形成根、芽等器官的过程⑤胚状体：有类似胚根、胚芽结构的新植物幼体第4页，共14页，星期日，2025年，2月5日4、影响植物组织培养的因素（1）材料：幼嫩的植物组织器官（全能性高，有毒物质少）（2）营养：无机营养：大量元素：N、P、S、K、Ca、Mg微量元素：有机营养：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等（3）植物激素：是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素。参见练习册P36页（4）外界条件：温度、PH值、光照等菊花组织培养的要求：温度18—22℃，PH=5.8，光照每日12h第5页，共14页，星期日，2025年，2月5日二、实验设计1、实验流程制备MS固体培养基外植体消毒接种培养移栽2、实验步骤（1）制备MS固体培养基MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，是植物组织培养过程中最常用的一种固体培养基。实验室一般使用4℃保存的配制好的母液来配制培养基。①配制母液：将各种成分按比例配制成浓缩液，使用时根据浓缩比例计算用量，加水稀释。②配制培养基：计算、称量、熔化、调PH值、分装、灭菌第6页，共14页，星期日，2025年，2月5日（２）外植体消毒（茎段）流水冲洗加洗衣粉，软刷刷洗流水冲洗20min无菌吸水纸吸干无菌吸水纸吸干70%酒精摇动6-7s无菌水清洗无菌吸水纸吸干0.1%HgCl浸泡1-2min无菌水清洗至少3次漂净消毒液第7页，共14页，星期日，2025年，2月5日（3）接种：要注意茎段的方向，形态学上端朝上（4）培养：菊花组织培养的要求：温度18—22℃，PH=5.8，光照每日12h（5）移栽：第8页，共14页，星期日，2025年，2月5日第9页，共14页，星期日，2025年，2月5日第10页，共14页，星期日，2025年，2月5日