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实验六薄层色谱分离偶氮染料

一、实验目的

⑴了解薄层色谱的基本原理和应用。

⑵掌握薄层色谱法的操作步骤和方法。

二、基本原理见本章2.5.2

三、仪器与药品

⑴仪器

玻璃片（可用显微镜载玻片）毛细管层析缸（可用带塞的锥形瓶）

⑵药品

A.1％偶氮苯的四氯化碳溶液B.0.01％对二甲基偶氮苯的四氯化碳溶液C.A与B的

混合液四氯化碳氯仿

四、操作步骤

⑴薄层板的制备

1

［］

薄层板制备的好坏，是实验成败的关键，薄层应尽可能牢固、均匀、厚度以0.25－

1mm为宜。

[2]

铺层方法有平铺法和倾注法。本实验采用倾注法：称取1.5g硅胶G于50小烧杯中，

加入约3蒸馏水，用玻璃棒轻轻搅匀（注意不要剧烈搅拌，以防将气泡带入匀浆，影响薄层

质量）。然后迅速将匀浆倾注在两块洗净、晾干的载玻片上。用食指和拇指拿住玻片两端，

前後左右轻轻摇晃，使流动的匀浆均匀地铺在玻璃片上，且表面光洁平整。晾干后放入烘箱

加热活化，调节烘箱缓缓升温至110℃恒温半小时，取出放在干燥器中备用。

⑵点样

在离薄层板1.5cm处，用铅笔轻轻画出一条直线，在一块板上点A和C，另一块板上

点B和C。点样时应选择管口平齐的玻璃毛细管，吸取少量样品液体，轻轻接触薄层板。

如果一次点样不够，可等溶剂挥发后再点数次，但控制样品点的扩散直径不超过3mm。

⑶展开

3

［］

以3：2的四氯化碳、氯仿混合液为展开剂，倒入层析缸内（液层厚度0.5mm）。将点

好样品的两块薄层板放入缸内，点样一端在下（注意样品点必须在展开剂液面之上）。盖好

缸盖，此时展开剂沿着薄层板上升，当展开剂前沿上升到距顶端1cm左右时取出薄层板。

尽快用铅笔标出前沿位置。晾干。

本实验所用样品本身有颜色，故无需显色。

⑷R值的计算

f

量出从原点到展开剂前沿以及到各色斑中心的距离。按2.5.2的公式计算R值，并鉴别

f

各色斑属于何种物质。

五、附注

［1］要得到粘结较牢的薄层板，玻片一定要洗干净，一般先用肥皂洗净，自来水、蒸馏水冲洗，必要

时用酒精擦洗，洗净后只拿切面。

［2］薄层吸附色谱用的吸附剂和柱色谱用的一样，有氧化铝和硅胶等。硅胶G是由硅胶和作为粘合

剂的煅石膏组成，使用时直接用蒸馏水调成匀浆。

［3］薄层色谱展开剂和柱色谱相同，主要根据样品的极性、溶解度和吸附活性等因素综合考虑。溶剂

的极性越大，则对化合物的洗脱力越大，即R值越大。如果发现样品的R值较大，可以考虑换极性小的溶

ff

剂，或在原来展开剂中加入适量极性较小的溶剂去展开。

六、思考题

⑴样品斑点过大有何坏处？若将样品点浸入展开剂液面下面会有何结果？

⑵在分离偶氮苯和对二甲基偶氮苯时，若增加展开剂中氯仿的比例，二者的R值有何变

f

化？